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MADB106
Krankheit
Adenokarzinom der Rattenbrustdrüse
Synonyme
MADB-106, MADB 106

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MADB106

Cell line · Artikelnummer 305205

Die Zelllinie MADB106 ist eine aus der Ratte der Linie Fischer 344 gewonnene Zelllinie eines Brustadenokarzinoms, die häufig in der Krebsforschung eingesetzt wird, insbesondere in Studien zu…

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Bei der Zelllinie MADB106 handelt es sich um eine Adenokarzinom-Zelllinie der Brust, die von der Fischer-344-Ratte stammt und häufig in der Krebsforschung verwendet wird, insbesondere in Studien zur Untersuchung der Metastasierung und der Immunantwort auf Tumore. Diese Zelllinie ist syngen mit dem Fischer 344 Rattenstamm, d.h. sie ist genetisch kompatibel, was die Untersuchung des Tumorwachstums und der Metastasierung in einer immunkompetenten Umgebung ermöglicht, die den physiologischen Bedingungen sehr ähnlich ist. MADB106-Zellen keimen und kolonisieren in erster Linie in der Lunge, wenn sie intravenös eingeführt werden, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Lungenmetastasierung macht.

Die Forschung mit MADB106-Zellen hat die entscheidende Rolle der natürlichen Killerzellen (NK) bei der Kontrolle der Metastasierung hervorgehoben. Insbesondere sind NK-Zellen in den frühen Stadien der Metastasierung aktiv, vor allem innerhalb der ersten Stunden nach der Inokulation von Tumorzellen. Studien haben gezeigt, dass die Abreicherung von NK-Zellen zu einem signifikanten Anstieg der Retention von Tumorzellen und der Metastasierung führt, was die Bedeutung der NK-Zellaktivität bei der Bekämpfung der Tumorausbreitung unterstreicht. Außerdem wurden altersbedingte Unterschiede in der NK-Zellaktivität beobachtet, wobei jüngere Tiere eine geringere NK-Zell-vermittelte Zytotoxizität aufweisen, was zu einer höheren Anfälligkeit für Metastasen führt. Diese Erkenntnisse machen MADB106 zu einem zentralen Modell für die Erforschung der Wechselwirkungen zwischen Immunsystem und Krebs, insbesondere der Mechanismen, die der NK-Zell-vermittelten Tumorkontrolle zugrunde liegen.

Krankheit
Adenokarzinom der Rattenbrustdrüse
Synonyme
  • MADB-106
  • MADB 106

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
MADB106 (Cytion-Katalognummer 305205)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_BT04

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase, 5 Min., 37 °C
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 bis 3 × 10⁴ Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
Fischer 344