Mine otse sisu juurde
MADB106
Haigus
Roti rinnanäärme adenokartsinoom
Sünonüümid
MADB-106, MADB 106

Dokumendid

MADB106

Cell line · Toote number 305205

Rakuliin MADB106 on Fischer 344 rottidelt saadud rinnanäärme adenokartsinoomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eriti uuringutes, mis käsitlevad...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MADB106 rakuliin on Fischer 344 rottidelt pärinev rinnavähi adenokartsinoomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eelkõige metastaaside ja kasvajate suhtes tekkiva immuunvastuse uurimisel. See rakuliin on Fischer 344 rottide tüvega süngeenne, mis tähendab, et see on geneetiliselt ühilduv, mis võimaldab uurida kasvaja kasvu ja metastaase immuunkompetentses keskkonnas, mis jäljendab täpselt füsioloogilisi tingimusi. MADB106-rakud asuvad peamiselt kopsudesse ja koloniseerivad neid, kui neid manustatakse veenisiseselt, mistõttu on need väärtuslik mudel kopsumetastaaside uurimiseks.

MADB106-rakke kasutavad uuringud on toonud esile looduslike tapjarakkude (NK-rakkude) otsustava rolli metastaaside kontrollimisel. Täpsemalt on NK-rakud aktiivsed metastaaside varajastes staadiumites, eriti esimeste tundide jooksul pärast kasvajarakkude süstimist. Uuringud on näidanud, et NK-rakkude arvu vähenemine toob kaasa kasvajarakkude kinnipidamise ja metastaaside olulise suurenemise, rõhutades NK-rakkude aktiivsuse tähtsust kasvaja leviku takistamisel. Lisaks on täheldatud vanusest tingitud erinevusi NK-rakkude aktiivsuses: noorematel loomadel on NK-rakkude vahendatud tsütotoksilisus vähenenud, mis põhjustab suuremat vastuvõtlikkust metastaaside tekkele. Need leiud muudavad MADB106-mudeli keskseks mudeliks immuunsüsteemi ja vähi vaheliste vastasmõjude uurimisel, eriti NK-rakkude vahendatud kasvajate kontrolli aluseks olevate mehhanismide uurimisel.

Haigus
Roti rinnanäärme adenokartsinoom
Sünonüümid
  • MADB-106
  • MADB 106

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
MADB106 (Cytioni katalooginumber 305205)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_BT04

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase, 5 min, 37 °C
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer 344