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MADB106
Doença
Adenocarcinoma da glândula mamária do rato
Sinónimos
MADB-106, MADB 106

Documentos

MADB106

Cell line · Número do produto 305205

A linha celular MADB106 é uma linha celular de adenocarcinoma mamário derivada do rato Fischer 344, frequentemente utilizada na investigação sobre o cancro, nomeadamente em estudos sobre...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MADB106 é uma linha celular de adenocarcinoma mamário derivada do rato Fischer 344, frequentemente utilizada na investigação do cancro, nomeadamente em estudos que analisam a metástase e a resposta imunitária aos tumores. Esta linha celular é singénica à estirpe de ratos Fischer 344, o que significa que é geneticamente compatível, permitindo o estudo do crescimento tumoral e da metástase num ambiente imunocompetente, que imita de perto as condições fisiológicas. As células MADB106 fixam-se e colonizam principalmente os pulmões quando introduzidas por via intravenosa, tornando-as um modelo valioso para o estudo da metástase pulmonar.

A investigação com células MADB106 destacou o papel crucial das células natural killer (NK) no controlo da metástase. Especificamente, as células NK estão ativas durante as fases iniciais da metástase, particularmente nas primeiras horas após a inoculação das células tumorais. Estudos demonstraram que a depleção das células NK conduz a um aumento significativo da retenção de células tumorais e da metástase, sublinhando a importância da atividade das células NK na resistência à propagação do tumor. Além disso, foram observadas diferenças relacionadas com a idade na atividade das células NK, com os animais mais jovens a apresentarem uma citotoxicidade mediada pelas células NK reduzida, o que resulta numa maior suscetibilidade à metástase. Estas descobertas tornam o MADB106 um modelo fundamental para explorar as interações entre o sistema imunitário e o cancro, em particular os mecanismos subjacentes ao controlo tumoral mediado pelas células NK.

Doença
Adenocarcinoma da glândula mamária do rato
Sinónimos
  • MADB-106
  • MADB 106

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
MADB106 (número de catálogo da Cytion 305205)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_BT04

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase, 5 min., 37 °C
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
Fischer 344