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MADB106
Malattia
Adenocarcinoma della ghiandola mammaria di ratto
Sinonimi
MADB-106, MADB 106

Documenti

MADB106

Cell line · Codice prodotto 305205

La linea cellulare MADB106 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario derivata dal ratto Fischer 344, comunemente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare negli studi su...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare MADB106 è una linea cellulare di adenocarcinoma mammario derivata dal ratto Fischer 344, comunemente utilizzata nella ricerca sul cancro, in particolare negli studi sulle metastasi e sulla risposta immunitaria ai tumori. Questa linea cellulare è sinergica al ceppo di ratto Fischer 344, cioè geneticamente compatibile, il che consente di studiare la crescita tumorale e le metastasi in un ambiente immunocompetente, che imita da vicino le condizioni fisiologiche. Le cellule MADB106 seminano e colonizzano principalmente i polmoni quando vengono introdotte per via endovenosa, il che le rende un modello prezioso per lo studio delle metastasi polmonari.

Le ricerche condotte con le cellule MADB106 hanno evidenziato il ruolo cruciale delle cellule natural killer (NK) nel controllo delle metastasi. In particolare, le cellule NK sono attive durante le prime fasi della metastasi, soprattutto nelle prime ore successive all'inoculazione delle cellule tumorali. Gli studi hanno dimostrato che la deplezione delle cellule NK porta a un aumento significativo della ritenzione delle cellule tumorali e delle metastasi, sottolineando l'importanza dell'attività delle cellule NK nel resistere alla diffusione del tumore. Inoltre, sono state osservate differenze legate all'età nell'attività delle cellule NK: gli animali più giovani mostrano una ridotta citotossicità mediata dalle cellule NK, con conseguente maggiore suscettibilità alle metastasi. Questi risultati rendono MADB106 un modello fondamentale per esplorare le interazioni tra sistema immunitario e cancro, in particolare i meccanismi alla base del controllo tumorale mediato dalle cellule NK.

Malattia
Adenocarcinoma della ghiandola mammaria di ratto
Sinonimi
  • MADB-106
  • MADB 106

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
MADB106 (numero di catalogo Cytion 305205)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_BT04

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase, 5 min., 37 °C
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
da 1 a 3 × 10⁴ cellule/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Fischer 344