Siirry sisältöön
MADB106
Sairaus
Rotan maitorauhasen adenokarsinooma
Synonyymit
MADB-106, MADB 106

Asiakirjat

MADB106

Cell line · Tuotenumero 305205

MADB106-solulinja on Fischer 344 -rotasta peräisin oleva rintarauhasen adenokarsinoomasolulinja, jota käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MADB106-solulinja on Fischer 344 -rotasta peräisin oleva rintarauhasen adenokarsinoomasolulinja, jota käytetään yleisesti syöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa selvitetään etäpesäkkeiden muodostumista ja immuunivastetta kasvaimiin. Tämä solulinja on syngeeninen Fischer 344 -rotan kannan kanssa, mikä tarkoittaa, että se on geneettisesti yhteensopiva. Tämä mahdollistaa kasvaimen kasvun ja etäpesäkkeiden tutkimisen immuunivastekykyisessä ympäristössä, joka jäljittelee tarkasti fysiologisia olosuhteita. MADB106-solut kiinnittyvät ja kolonisoivat ensisijaisesti keuhkoihin, kun ne viedään laskimoon, mikä tekee niistä arvokkaan mallin keuhkometastaasien tutkimiseen.

MADB106-soluja hyödyntävä tutkimus on tuonut esiin luonnollisten tappajasolujen (NK-solujen) ratkaisevan roolin etäpesäkkeiden hallinnassa. Erityisesti NK-solut ovat aktiivisia etäpesäkkeiden varhaisvaiheissa, etenkin ensimmäisten tuntien aikana kasvainsolujen istuttamisen jälkeen. Tutkimukset ovat osoittaneet, että NK-solujen väheneminen johtaa kasvainsolujen kertymisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen merkittävään lisääntymiseen, mikä korostaa NK-solujen aktiivisuuden tärkeyttä kasvaimen leviämisen estämisessä. Lisäksi NK-solujen aktiivisuudessa on havaittu ikään liittyviä eroja: nuoremmilla eläimillä NK-solujen välittämä sytotoksisuus on vähäisempää, mikä johtaa suurempaan alttiuteen etäpesäkkeille. Nämä havainnot tekevät MADB106-mallista keskeisen mallin immuunijärjestelmän ja syövän välisten vuorovaikutusten tutkimiseen, erityisesti NK-solujen välittämän kasvainten torjunnan taustalla olevien mekanismien selvittämiseen.

Sairaus
Rotan maitorauhasen adenokarsinooma
Synonyymit
  • MADB-106
  • MADB 106

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
MADB106 (Cytionin tuotenumero 305205)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_BT04

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase, 5 min., 37 °C
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Fischer 344