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Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion
Gewebe
Amnion
Krankheit
Normale mesenchymale Stammzellen aus dem Amnion (nicht tumorogen; aus Plazentagewebe gewonnen, unter Einhaltung ethischer Grundsätze)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (normale, nicht tumorogene primäre Stammzelle)

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Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion

Cell line · Artikelnummer 300644

Amnion-derived Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) possess several distinctive features that differentiate them from MSCs derived from other tissues, suc...

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Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Aus dem Amnion stammende humane mesenchymale Stammzellen (hMSCs) weisen mehrere besondere Merkmale auf, die sie von MSCs aus anderen Geweben wie Knochenmark, Fettgewebe und Nabelschnur unterscheiden. Eines der wichtigsten Unterscheidungsmerkmale ist ihre Herkunft aus dem Amnion, einer Membran der Plazenta, die ihnen einzigartige biologische Eigenschaften verleiht. Im Gegensatz zu MSZ aus adulten Geweben sind hMSZ aus dem Amnion primitiver und weisen eine höhere Proliferationskapazität auf, die eine längere Expansion in der Kultur ohne signifikanten Verlust des Differenzierungspotenzials oder der Stammzellen ermöglicht. Diese hohe Proliferationsfähigkeit ist besonders vorteilhaft für Anwendungen, die große Zellmengen erfordern, wie z. B. Tissue Engineering und regenerative Medizin.

Ein weiterer wichtiger Unterschied liegt in den immunmodulatorischen Eigenschaften von hMSCs aus Amnion. Diese Zellen weisen im Vergleich zu MSCs aus anderen Quellen verbesserte immunsuppressive Fähigkeiten auf, was sie bei der Modulation von Immunreaktionen sehr effektiv macht. Diese Eigenschaft ist besonders nützlich bei der Erforschung von Entzündungskrankheiten, Autoimmunerkrankungen und der Transplantat-gegen-Wirt-Krankheit (GVHD). Amnion hMSCs sezernieren auch ein ausgeprägtes Profil bioaktiver Moleküle, einschließlich entzündungshemmender Zytokine und Wachstumsfaktoren, die zu ihrer überlegenen Fähigkeit beitragen, die Gewebereparatur zu fördern und Entzündungen in verschiedenen In-vitro-Modellen zu reduzieren.

Darüber hinaus sind hMSCs aus dem Amnion für ihre geringere Immunogenität im Vergleich zu MSCs aus anderen Geweben bekannt. Dieses geringere Potenzial, eine Immunreaktion auszulösen, macht sie besonders geeignet für allogene Anwendungen und Co-Kultursysteme, in denen Interaktionen zwischen verschiedenen Zelltypen ohne die Komplikation einer Immunabstoßung untersucht werden. Darüber hinaus werden hMSCs aus dem Plazentagewebe gesunder Spenderinnen gewonnen, was ethische Bedenken ausräumt, die mit MSCs verbunden sind, die aus invasiveren Verfahren wie der Entnahme von Knochenmark stammen. Zusammengenommen machen diese Eigenschaften amnionale hMSCs zu einem einzigartigen und vielseitigen Instrument für ein breites Spektrum biomedizinischer Forschungsanwendungen.

Gewebe
Amnion
Krankheit
Normale mesenchymale Stammzellen aus dem Amnion (nicht tumorogen; aus Plazentagewebe gewonnen, unter Einhaltung ethischer Grundsätze)
Metastasenherd
Nicht zutreffend (normale, nicht tumorogene primäre Stammzelle)
Anwendungen
Arzneimitteltests, regenerative Medizin, Krankheitsforschung

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; primary human mesenchymal stem cells isolated from amnion (placental tissue). Not transformed or immortalized.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Gut verteilte spindelförmige, fibroblastenähnliche Morphologie für mindestens 5 Passagen. Weniger als 2 % der Zellen weisen in jeder Passage eine spontane myofibroblastenähnliche Morphologie auf.
Zelltyp
Stammzelle

04Bezeichner

Quellenangabe
Humane mesenchymale Stammzellen, Amnion (Cytion Katalognummer 300644)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Ein umfassendes Panel von Markern, darunter CD73/CD90/CD105 (positiv) und CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativ), wird in der Durchflusszytometrie-Analyse verwendet, um kultivierte MSC (P2-P3) vor der Kryokonservierung zu identifizieren. Diese Marker werden vom MSC-Ausschuss der ISCT empfohlen.
Viren
Der Spender ist negativ für HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) und HIV-1/2 (IFA); die Zellen sind negativ für HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum und Ureaplasma parvum.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, ohne: Ribonukleoside, w/o: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissoziationsreagenz
Trypsin-EDTA
Subkultivierung
Für die routinemäßige adhärente Zellkultur: Saugen Sie das alte Kulturmedium von den adhärenten Zellen ab und waschen Sie sie mit PBS, um das restliche Medium zu entfernen. Nach dem Absaugen des PBS die entsprechende Menge Trypsin/EDTA-Lösung je nach Größe des Kulturgefäßes zugeben (z. B. 1 ml für einen T25-Kolben, 3 ml für einen T75-Kolben) und bei Raumtemperatur oder 37 °C inkubieren, bis sich die Zellen ablösen (5-10 Minuten). Überwachen Sie die Ablösung unter dem Mikroskop und klopfen Sie bei Bedarf vorsichtig auf das Gefäß, um die Zellen freizusetzen. Sobald sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie vollständiges Medium hinzu, um das Trypsin/EDTA zu inaktivieren, resuspendieren Sie die Zellen vorsichtig und transferieren Sie einen aliquoten Teil der Zellsuspension in ein neues Kulturgefäß mit frischem Medium. Stellen Sie das Gefäß in einen auf 37°C und 5%CO2 eingestellten Inkubator und wechseln Sie das Medium alle 2-3 Tage.
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
Erste Flüssigkeitserneuerung nach 24 Stunden, dann alle 2 bis 3 Tage.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 80 % FBS + 10 % Basalmedium + 10 % DMSO, um die Lebensfähigkeit zu erhalten, oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) für einen besseren Kryoschutz, der eine unerwünschte Differenzierung verhindert und gleichzeitig die Pluripotenz bewahrt.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Bitte anfragen
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch