Pāriet uz saturu
Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion
Audums
Amnion
Slimība
Normālas mezenhīmālās cilmes šūnas, iegūtas no amniona (netumorogēnas; ētiski iegūtas no placentas audiem)
Metastāžu vieta
Neattiecas (normāla, netumorogēna primārā cilmes šūna)

Dokumenti

Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion

Cell line · Preces numurs 300644

Amnion-derived Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) possess several distinctive features that differentiate them from MSCs derived from other tissues, suc...

€690.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

No amnija iegūtajām cilvēka mezenhimālajām cilmes šūnām (hMSC) piemīt vairākas īpatnības, kas tās atšķir no MSC, kas iegūtas no citiem audiem, piemēram, kaulu smadzenēm, taukaudiem un nabassaites. Viena no būtiskākajām atšķirībām ir to izcelsme no amnija, placentas membrānas, kas piešķir tām unikālas bioloģiskās īpašības. Atšķirībā no pieaugušo audu MSC, amnija hMSC ir primitīvākas un tām piemīt lielāka proliferācijas spēja, kas ļauj tās paplašināt kultūrā, būtiski nezaudējot diferenciācijas potenciālu vai cilmes īpašības. Šī augstā proliferatīvā spēja ir īpaši izdevīga lietojumiem, kam nepieciešams liels šūnu daudzums, piemēram, audu inženierijā un reģeneratīvajā medicīnā.

Vēl viena būtiska atšķirība ir amnija hMSC imunomodulējošās īpašības. Šīm šūnām piemīt uzlabotas imūnsupresīvās spējas salīdzinājumā ar citu avotu MSC, padarot tās ļoti efektīvas imūnās reakcijas modulēšanā. Šī īpašība ir īpaši noderīga pētījumos, kas vērsti uz iekaisuma slimībām, autoimūnām slimībām un pārstādījuma pret saimnieku slimību (GVHD). Amnion hMSCs izdala arī atšķirīgu bioaktīvo molekulu profilu, tostarp pretiekaisuma citokīnus un augšanas faktorus, kas veicina to lielisko spēju veicināt audu atjaunošanos un mazināt iekaisumu dažādos in vitro modeļos.

Turklāt amnija hMSC ir pazīstamas ar zemāku imunogenitāti salīdzinājumā ar MSC, kas iegūtas no citiem audiem. Šī samazinātā iespēja izraisīt imūnreakciju padara tās īpaši piemērotas alogēniem lietojumiem un kopkultūru sistēmām, kurās tiek pētīta mijiedarbība starp dažādiem šūnu tipiem bez sarežģījumiem, ko rada imūnā atgrūšana. Turklāt amnija hMSC ir ētiski iegūtas no veselu donoru placentas audiem, tādējādi novēršot ētiskās problēmas, kas saistītas ar MSC, kas iegūtas, izmantojot invazīvākas procedūras, piemēram, kaulu smadzeņu aspirāciju. Kopumā šīs īpašības padara amnija hMSC par unikālu un daudzpusīgu instrumentu plašam biomedicīnisko pētījumu pielietojumu klāstam.

Audums
Amnion
Slimība
Normālas mezenhīmālās cilmes šūnas, iegūtas no amniona (netumorogēnas; ētiski iegūtas no placentas audiem)
Metastāžu vieta
Neattiecas (normāla, netumorogēna primārā cilmes šūna)
Pieteikumi
Zāļu testēšana, reģeneratīvā medicīna, slimību izpēte

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; primary human mesenchymal stem cells isolated from amnion (placental tissue). Not transformed or immortalized.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Labi izkliedēta vārpstas formas, fibroblastiem līdzīga morfoloģija vismaz 5 pasāžu laikā. Mazāk nekā 2 % šūnu katrā pasāžā uzrāda spontānu miofibroblastiem līdzīgu morfoloģiju.
Šūnu tips
Cilmes šūnas

04Identifikatori

Atsauce
Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas, Amnion (Cytion kataloga numurs 300644)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Lai identificētu kultivētās MSC (P2-P3) pirms kriokonservēšanas, plūsmas citometrijas analīzē izmanto plašu marķieru paneli, tostarp CD73/CD90/CD105 (pozitīvi) un CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatīvi). Šos marķierus iesaka ISCT MSC komiteja.
Vīrusi
Donors ir negatīvs uz HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) un HIV-1/2 (IFA). Šūnas ir negatīvas uz HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum un Ureaplasma parvum.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w/o: Ribonukleozīdi, w/o: Deoksiribonukleozīdi, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociācijas reaģents
Tripsīns-EDTA
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Pirmā šķidruma atjaunošana pēc 24 stundām, pēc tam ik pēc 2 līdz 3 dienām.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā krioprezervēšanas barotni mēs izmantojam 80 % FBS + 10 % bāzes barotni + 10 % DMSO, lai saglabātu dzīvotspēju, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas nodrošina labāku krioprotekciju, novēršot nevēlamu diferenciāciju, vienlaikus saglabājot pluripotenci.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Lūdzu, jautājiet
Etniskā piederība
Kaukāzietis