Prejsť na obsah
Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion
Tkanivo
Amnion
Choroba
Normálne mezenchýmové kmeňové bunky pochádzajúce z amnionu (netumorogénne; získané etickým spôsobom z placentárneho tkaniva)
Miesto metastáz
Neplatí (normálna, netumorogénna primárna kmeňová bunka)

Dokumenty

Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion

Cell line · Číslo výrobku 300644

Amnion-derived Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) possess several distinctive features that differentiate them from MSCs derived from other tissues, suc...

€690.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

Ľudské mezenchýmové kmeňové bunky (hMSC) odvodené z amnionu majú niekoľko charakteristických vlastností, ktoré ich odlišujú od MSC odvodených z iných tkanív, ako je kostná dreň, tukové tkanivo a pupočník. Jednou z najvýznamnejších odlišností je ich pôvod z amnionu, membrány placenty, ktorá im prepožičiava jedinečné biologické vlastnosti. Na rozdiel od MSC z dospelých tkanív sú amnionové hMSC primitívnejšie a vykazujú vyššiu proliferačnú kapacitu, čo umožňuje ich dlhšiu expanziu v kultúre bez výraznej straty diferenciačného potenciálu alebo kmeňovitosti. Táto vysoká proliferačná schopnosť je obzvlášť výhodná pre aplikácie vyžadujúce veľké množstvá buniek, ako je napríklad tkanivové inžinierstvo a regeneratívna medicína.

Ďalší kľúčový rozdiel spočíva v imunomodulačných vlastnostiach amnionových hMSC. Tieto bunky vykazujú zvýšené imunosupresívne schopnosti v porovnaní s MSC z iných zdrojov, vďaka čomu sú veľmi účinné pri modulácii imunitných reakcií. Táto vlastnosť je obzvlášť užitočná vo výskume zameranom na zápalové ochorenia, autoimunitné stavy a ochorenie štepu proti hostiteľovi (GVHD). Amnionové hMSC tiež vylučujú odlišný profil bioaktívnych molekúl vrátane protizápalových cytokínov a rastových faktorov, ktoré prispievajú k ich vynikajúcej schopnosti podporovať obnovu tkanív a znižovať zápal v rôznych modeloch in vitro.

Okrem toho sú amnionové hMSC známe svojou nižšou imunogenicitou v porovnaní s MSC odvodenými z iných tkanív. Tento znížený potenciál vyvolávať imunitnú odpoveď ich robí obzvlášť vhodnými na alogénne aplikácie a systémy spoločných kultúr, kde sa študujú interakcie medzi rôznymi typmi buniek bez komplikácií imunitného odmietnutia. Okrem toho amnionové hMSC pochádzajú z etického hľadiska z placentárneho tkaniva zdravých darcov, čím sa eliminujú etické problémy spojené s MSC získanými invazívnejšími postupmi, ako je napríklad aspirácia kostnej drene. Tieto vlastnosti spoločne robia z amnionových hMSC jedinečný a všestranný nástroj pre širokú škálu aplikácií v biomedicínskom výskume.

Tkanivo
Amnion
Choroba
Normálne mezenchýmové kmeňové bunky pochádzajúce z amnionu (netumorogénne; získané etickým spôsobom z placentárneho tkaniva)
Miesto metastáz
Neplatí (normálna, netumorogénna primárna kmeňová bunka)
Aplikácie
Testovanie liekov, regeneratívna medicína, výskum chorôb

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; primary human mesenchymal stem cells isolated from amnion (placental tissue). Not transformed or immortalized.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Dobre rozložená vretenovitá morfológia podobná fibroblastom aspoň v rámci 5 pasáží. Menej ako 2 % buniek vykazuje spontánnu morfológiu podobnú myofibroblastom v rámci každej pasáže.
Typ bunky
Kmeňové bunky

04Identifikátory

Citácia
Ľudské mezenchýmové kmeňové bunky, amnion (katalógové číslo Cytion 300644)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
Komplexný panel markerov vrátane CD73/CD90/CD105 (pozitívne) a CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatívne) sa používa pri analýze prietokovou cytometriou na identifikáciu kultivovaných MSC (P2-P3) pred kryokonzerváciou. Tieto markery odporúča výbor ISCT MSC.
Vírusy
Darca je negatívny na HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) a HIV-1/2 (IFA). Bunky sú negatívne na HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum a Ureaplasma parvum.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w/o: Ribonukleozidy, w/o: Deoxyribonukleozidy, w: 1,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Disociačné činidlo
Trypsín-EDTA
Rozmnožovanie kultúr
Na bežné adherentné bunkové kultúry: Odstráňte staré kultivačné médium z adherentných buniek a premyte ich PBS, aby ste odstránili zvyšné médium. Po odsatí PBS pridajte príslušný objem roztoku trypsínu/EDTA podľa veľkosti kultivačnej nádoby (napr. 1 ml pre banku T25, 3 ml pre banku T75) a inkubujte pri izbovej teplote alebo 37 °C, kým sa bunky neoddelia (5 - 10 minút). Oddeľovanie sledujte pod mikroskopom a v prípade potreby jemne poklepte na nádobu, aby sa bunky uvoľnili. Po oddelení pridajte kompletné médium na inaktiváciu trypsínu/EDTA, jemne resuspendujte bunky a alikvotnú časť bunkovej suspenzie preneste do novej kultivačnej nádoby obsahujúcej čerstvé médium. Nádobu umiestnite do inkubátora nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a médium vymieňajte každé 2 - 3 dni.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
Prvá obnova tekutín po 24 hodinách, potom každé 2 až 3 dni.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryoprezervačné médium používame 80 % FBS + 10 % bazálneho média + 10 % DMSO na udržanie životaschopnosti alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100) na lepšiu kryoprotekciu, ktorá zabraňuje nežiaducej diferenciácii a zároveň zachováva pluripotenciu.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Prosím, opýtajte sa
Etnická príslušnosť
Kaukazský