Mine otse sisu juurde
Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion
Kude
Amnion
Haigus
Tavalised mesenküümsed tüvirakud, saadud amnionist (ei põhjusta kasvajate teket; eetiliselt hangitud platsenta koest)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (normaalne, mittetumorigeenne primaarne tüvirakk)

Dokumendid

Human Mesenchymal Stem Cells, Amnion

Cell line · Toote number 300644

Amnion-derived Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) possess several distinctive features that differentiate them from MSCs derived from other tissues, suc...

€690.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Inimese mesenhüümsetel tüvirakkudel (hMSC) on mitmeid eripärasid, mis eristavad neid teistest kudedest, näiteks luuüdist, rasvkoest ja nabanöörist saadud MSC-dest. Üks olulisemaid erinevusi on nende päritolu platsenta membraanist (amnion), mis annab neile unikaalsed bioloogilised omadused. Erinevalt täiskasvanud kudedest pärinevatest MSC-dest on amnioni hMSC-d primitiivsemad ja neil on suurem proliferatsioonivõime, mis võimaldab kultuuris pikemat laienemist ilma diferentseerumispotentsiaali või tüvelisuse märkimisväärse kaotamiseta. See kõrge proliferatsioonivõime on eriti kasulik rakenduste puhul, mis nõuavad suuri rakukoguseid, nagu näiteks koetehnoloogia ja regeneratiivne meditsiin.

Teine oluline erinevus seisneb amnioni hMSCde immunomoduleerivates omadustes. Need rakud näitavad võrreldes teistest allikatest pärit MSC-dega suurenenud immunosupressiivseid võimeid, mis muudab need immuunvastuse moduleerimisel väga tõhusaks. See omadus on eriti kasulik põletikuliste haiguste, autoimmuunsete seisundite ja transplantaadi ja peremehe vastase haiguse (GVHD) uurimisel. Amnioni hMSCd eritavad ka eraldi bioaktiivsete molekulide profiili, sealhulgas põletikuvastased tsütokiinid ja kasvufaktorid, mis aitavad kaasa nende paremale võimele edendada kudede taastumist ja vähendada põletikku erinevates in vitro mudelites.

Lisaks on amnioni hMSCd tuntud oma väiksema immunogeensuse poolest võrreldes teistest kudedest saadud MSCdega. See vähene immuunvastuse esilekutsumise potentsiaal muudab nad eriti sobivaks allogeensete rakenduste ja ko-kultuurisüsteemide jaoks, kus uuritakse erinevate rakutüüpide vahelisi koostoimeid ilma immuunsüsteemi tõrjumise komplikatsioonideta. Lisaks sellele saadakse amnioni hMSC-d eetiliselt tervete doonorite platsenta koest, kõrvaldades eetilised probleemid, mis on seotud invasiivsemate protseduuride, näiteks luuüdi aspiratsiooni abil saadud MSC-dega. Kõik need omadused teevad amnioni hMSC-d ainulaadseks ja mitmekülgseks vahendiks paljude biomeditsiiniliste uuringute jaoks.

Kude
Amnion
Haigus
Tavalised mesenküümsed tüvirakud, saadud amnionist (ei põhjusta kasvajate teket; eetiliselt hangitud platsenta koest)
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (normaalne, mittetumorigeenne primaarne tüvirakk)
Rakendused
Ravimitestid, regeneratiivne meditsiin, haiguste uurimine

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; primary human mesenchymal stem cells isolated from amnion (placental tissue). Not transformed or immortalized.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Hästi levinud spindlikujuline, fibroblastilaadne morfoloogia vähemalt 5 läbimise jooksul. Vähem kui 2% rakkudest ilmutab iga läbimise jooksul spontaanset müofibroblastilaadset morfoloogiat.
Rakutüüp
Tüvirakud

04Tunnused

Viide
Inimese mesenhümaalsed tüvirakud, Amnion (Cytion katalooginumber 300644)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Voolutsütomeetrilises analüüsis kasutatakse ulatuslikku markerite paneeli, sealhulgas CD73/CD90/CD105 (positiivne) ja CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatiivne), et tuvastada kultiveeritud MSC-d (P2-P3) enne krüokonserveerimist. Neid markereid soovitab ISCT MSC komitee.
Viirused
Doonor on negatiivne HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) ja HIV-1/2 (IFA) suhtes. Rakud on negatiivsed HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum ja Ureaplasma parvum suhtes.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w/o: Ribonukleosiidid, w/o: Deoksüribonukleosiidid, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissotsiatsioonireaktiiv
Trypsin-EDTA
Kultuuri edasikasvatamine
Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37 °C, kuni rakud eralduvad (5-10 minutit). Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kasvatusanumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Esimene vedeliku uuendamine 24 tunni pärast, seejärel iga 2 kuni 3 päeva järel.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimise söötmena kasutame 80% FBS + 10% põhikeskkonda + 10% DMSO elujõulisuse säilitamiseks või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis tagab parema krüosekaitse, vältides soovimatu diferentseerumise, säilitades samal ajal pluripotentsuse.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Palun küsige
Etniline kuuluvus
Kaukaasia