Mine otse sisu juurde
UWO37 rakud
Kude
Suuõõne; mandlid
Haigus
Suuõõne käärsoole kartsinoom
Sünonüümid
University of Western Ontario 37

Dokumendid

UWO37 rakud

Cell line · Toote number 300257

Rakuliin UWO37 (HPV16) on saadud suuõõne keelevähiga diagnoositud meespatsiendi kasvajarakkudest ning selles esineb inimese papilloomiviiruse ekspressioon...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

UWO37 (HPV16) rakuliin on saadud suulise keelevähi diagnoosiga meespatsiendi kasvajarakkudest ja sellel on inimese papilloomiviiruse 16. tüübi (HPV16) ekspressioon. See rakuliin on keskse tähtsusega uurimaks molekulaarseid mehhanisme, mille abil HPV16 aitab kaasa pea ja kaela lamerakk-kartsinoomi (HNSCC) patogeneesile. Kuna UWO37 pakub mudelisüsteemi, mis säilitab algse kasvaja geneetilised ja fenotüüpilised omadused, võimaldab see üksikasjalikult uurida viiruse onkogeneesi, viiruse valkude ja peremeesrakkude vahelist koostoimet ning rakkude reaktsioone HPV16 integratsioonile.

UWO37 rakuliini kasutavad uuringud keskenduvad HPV16 ja rakumasinate keerulise koostoime avamisele, selgitades välja, kuidas viiruse onkogeenid, nagu E6 ja E7, aitavad kaasa raku transformatsioonile ja pahaloomulisusele. See mudel on oluline ka potentsiaalsete farmakoloogiliste ainete sõelumiseks ja geeniteraapia arendamiseks, mille eesmärk on suunatud HPV16 poolt muudetud konkreetsetele radadele. Lisaks on UWO37 rakuliin väärtuslik vahend uute immunoteraapiliste strateegiate tõhususe ja ohutuse uurimiseks, mis võib viia HPV-ga seotud vähkkasvajate parema ravi ja ennetamiseni.

Kude
Suuõõne; mandlid
Haigus
Suuõõne käärsoole kartsinoom
Rakendused
Tsisplatiiniresistentsete HPV-positiivsete HNSCC rakuliinide loomine tsisplatiiniresistentsuse uurimiseks HPV-positiivsete rakkude puhul
Sünonüümid
  • University of Western Ontario 37

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Tunnused

Viide
UWO37 (Cytioni katalooginumber 300257)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: inimese papilloomiviiruse tüüp 16 (HPV16); HPV16 E7 nõrk ekspressioon

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
64 aastat