Gå til innholdet
UWO37-celler
Vev
Munnhulen; mandlene
Sykdom
Plateepitelkarsinom i oropharynx
Synonymer
University of Western Ontario 37

Dokumenter

UWO37-celler

Cell line · Produktnummer 300257

Cellelinjen UWO37 (HPV16) stammer fra tumorcellene til en mannlig pasient som fikk diagnosen kreft i tungen, og viser uttrykk for humant papillomvirus...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

UWO37 (HPV16)-cellelinjen er avledet fra tumorceller fra en mannlig pasient som har fått diagnosen kreft i munnhulen, og viser uttrykk for humant papillomavirus type 16 (HPV16). Denne cellelinjen er avgjørende for å undersøke de molekylære mekanismene som HPV16 bidrar med i patogenesen av plateepitelkarsinom i hode og hals (HNSCC). UWO37 er et modellsystem som beholder de genetiske og fenotypiske egenskapene til den opprinnelige svulsten, og gjør det mulig å undersøke virusets onkogenese, interaksjoner mellom virusproteiner og vertscelleveier, og cellens respons på HPV16-integrasjon.

Forskningen på UWO37-cellelinjen fokuserer på å avdekke det komplekse samspillet mellom HPV16 og det cellulære maskineriet, og på å identifisere hvordan virale onkogener som E6 og E7 bidrar til celletransformasjon og malignitet. Denne modellen er også avgjørende for screening av potensielle farmakologiske midler og for utvikling av genterapi rettet mot spesifikke signalveier som er endret av HPV16. UWO37-cellelinjen er dessuten et verdifullt verktøy for å studere effekten av og sikkerheten ved nye immunterapeutiske strategier, noe som kan føre til bedre behandling og forebygging av HPV-relatert kreft.

Vev
Munnhulen; mandlene
Sykdom
Plateepitelkarsinom i oropharynx
Søknader
Generering av cisplatinresistente HPV-positive HNSCC-cellelinjer for å studere cisplatinresistens i HPV-positive celler
Synonymer
  • University of Western Ontario 37

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
2

03Identifikatorer

Kildehenvisning
UWO37 (Cytion-katalognummer 300257)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: Humant papillomavirus type 16 (HPV16); svakt uttrykk av HPV16 E7

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
64 år