Přejít na obsah
Buňky UWO37
Tkáň
Ústní dutina; mandle
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom orofaryngu
Synonyma
University of Western Ontario 37

Dokumenty

Buňky UWO37

Cell line · Číslo výrobku 300257

Buněčná linie UWO37 (HPV16) byla odvozena z nádorových buněk pacienta mužského pohlaví, u kterého byla diagnostikována rakovina jazyka, a vykazuje expresi lidského papilomaviru...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie UWO37 (HPV16) je odvozena z nádorových buněk muže s diagnózou karcinomu jazyka a vykazuje expresi lidského papilomaviru typu 16 (HPV16). Tato buněčná linie je klíčová pro zkoumání molekulárních mechanismů, kterými HPV16 přispívá k patogenezi dlaždicobuněčného karcinomu hlavy a krku (HNSCC). Díky tomu, že UWO37 poskytuje modelový systém, který si zachovává genetické a fenotypové charakteristiky původního nádoru, umožňuje detailní zkoumání virové onkogeneze, interakcí mezi virovými proteiny a cestami hostitelských buněk a buněčných reakcí na integraci HPV16.

Výzkum využívající buněčnou linii UWO37 se zaměřuje na odhalení komplexní interakce mezi HPV16 a buněčnými mechanismy a zjišťuje, jak virové onkogeny, jako jsou E6 a E7, přispívají k transformaci buněk a malignitě. Tento model je také klíčový pro screening potenciálních farmakologických látek a pro vývoj přístupů genové terapie zaměřených na specifické dráhy změněné HPV16. Buněčná linie UWO37 navíc slouží jako cenný nástroj pro studium účinnosti a bezpečnosti nových imunoterapeutických strategií, které by mohly vést ke zlepšení léčby a prevence rakoviny související s HPV.

Tkáň
Ústní dutina; mandle
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom orofaryngu
Aplikace
Vytvoření buněčných linií HPV pozitivního HNSCC rezistentních na cisplatinu ke studiu rezistence na cisplatinu u HPV pozitivních buněk
Synonyma
  • University of Western Ontario 37

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Identifikátory

Citace
UWO37 (katalogové číslo Cytion 300257)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Exprese a náchylnost

Viry
Transformant: lidský papilomavirus typu 16 (HPV16); slabá exprese HPV16 E7

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
64 let