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Cellule UWO37
Tessuto
Cavità orale; tonsille
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'orofaringe
Sinonimi
University of Western Ontario 37

Documenti

Cellule UWO37

Cell line · Codice prodotto 300257

La linea cellulare UWO37 (HPV16) deriva dalle cellule tumorali di un paziente di sesso maschile a cui era stato diagnosticato un carcinoma della lingua e presenta l'espressione del papillomavirus umano...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare UWO37 (HPV16) deriva dalle cellule tumorali di un paziente maschio con diagnosi di carcinoma orale della lingua e presenta l'espressione del Papillomavirus umano di tipo 16 (HPV16). Questa linea cellulare è fondamentale per le indagini sui meccanismi molecolari con cui HPV16 contribuisce alla patogenesi del carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Fornendo un sistema modello che conserva le caratteristiche genetiche e fenotipiche del tumore originale, UWO37 consente di esplorare in dettaglio l'oncogenesi virale, le interazioni tra le proteine virali e le vie cellulari dell'ospite e le risposte cellulari all'integrazione di HPV16.

La ricerca che utilizza la linea cellulare UWO37 si concentra sullo svelamento della complessa interazione tra HPV16 e macchinari cellulari, identificando come gli oncogeni virali come E6 ed E7 contribuiscano alla trasformazione cellulare e alla malignità. Questo modello è fondamentale anche per lo screening di potenziali agenti farmacologici e per lo sviluppo di approcci di terapia genica mirati a colpire specifiche vie alterate dall'HPV16. Inoltre, la linea cellulare UWO37 è uno strumento prezioso per studiare l'efficacia e la sicurezza di nuove strategie immunoterapiche, che potrebbero portare a un miglioramento del trattamento e della prevenzione dei tumori HPV-correlati.

Tessuto
Cavità orale; tonsille
Malattia
Carcinoma a cellule squamose dell'orofaringe
Applicazioni
Generazione di linee cellulari HNSCC HPV-positive resistenti al cisplatino per studiare la resistenza al cisplatino nelle cellule HPV-positive
Sinonimi
  • University of Western Ontario 37

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Identificatori

Riferimento bibliografico
UWO37 (numero di catalogo Cytion 300257)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: papillomavirus umano di tipo 16 (HPV16); debole espressione di HPV16 E7

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
64 anni