
- Tessuto
- Cavità orale; tonsille
- Malattia
- Carcinoma a cellule squamose dell'orofaringe
- Sinonimi
- University of Western Ontario 37
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Cellule UWO37
Cell line · Codice prodotto 300257
La linea cellulare UWO37 (HPV16) deriva dalle cellule tumorali di un paziente di sesso maschile a cui era stato diagnosticato un carcinoma della lingua e presenta l'espressione del papillomavirus umano...
Personalizzazione / Suggerimenti
- Cellule UWO37Cell line€550.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
La linea cellulare UWO37 (HPV16) deriva dalle cellule tumorali di un paziente maschio con diagnosi di carcinoma orale della lingua e presenta l'espressione del Papillomavirus umano di tipo 16 (HPV16). Questa linea cellulare è fondamentale per le indagini sui meccanismi molecolari con cui HPV16 contribuisce alla patogenesi del carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Fornendo un sistema modello che conserva le caratteristiche genetiche e fenotipiche del tumore originale, UWO37 consente di esplorare in dettaglio l'oncogenesi virale, le interazioni tra le proteine virali e le vie cellulari dell'ospite e le risposte cellulari all'integrazione di HPV16.
La ricerca che utilizza la linea cellulare UWO37 si concentra sullo svelamento della complessa interazione tra HPV16 e macchinari cellulari, identificando come gli oncogeni virali come E6 ed E7 contribuiscano alla trasformazione cellulare e alla malignità. Questo modello è fondamentale anche per lo screening di potenziali agenti farmacologici e per lo sviluppo di approcci di terapia genica mirati a colpire specifiche vie alterate dall'HPV16. Inoltre, la linea cellulare UWO37 è uno strumento prezioso per studiare l'efficacia e la sicurezza di nuove strategie immunoterapiche, che potrebbero portare a un miglioramento del trattamento e della prevenzione dei tumori HPV-correlati.
- Tessuto
- Cavità orale; tonsille
- Malattia
- Carcinoma a cellule squamose dell'orofaringe
- Applicazioni
- Generazione di linee cellulari HNSCC HPV-positive resistenti al cisplatino per studiare la resistenza al cisplatino nelle cellule HPV-positive
- Sinonimi
- University of Western Ontario 37
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 2
03Identificatori
- Riferimento bibliografico
- UWO37 (numero di catalogo Cytion 300257)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7MH
04Espressione e suscettibilità
- Virus
- Trasformante: papillomavirus umano di tipo 16 (HPV16); debole espressione di HPV16 E7
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Età dei donatori
- 64 anni
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì