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Células UWO37
Tecido
Cavidade oral; amígdala
Doença
Carcinoma de células escamosas da orofaringe
Sinónimos
University of Western Ontario 37

Documentos

Células UWO37

Cell line · Número do produto 300257

A linha celular UWO37 (HPV16) é derivada das células tumorais de um doente do sexo masculino diagnosticado com cancro da língua oral e apresenta expressão do papilomavírus humano...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular UWO37 (HPV16) é derivada das células tumorais de um doente do sexo masculino a quem foi diagnosticado cancro da língua oral e exibe a expressão do Papilomavírus Humano tipo 16 (HPV16). Esta linha celular é fundamental para as investigações sobre os mecanismos moleculares através dos quais o HPV16 contribui para a patogénese do carcinoma de células escamosas da cabeça e do pescoço (HNSCC). Ao fornecer um sistema modelo que mantém as caraterísticas genéticas e fenotípicas do tumor original, a UWO37 permite uma exploração detalhada da oncogénese viral, das interações entre as proteínas virais e as vias celulares do hospedeiro e das respostas celulares à integração do HPV16.

A investigação que utiliza a linha celular UWO37 centra-se em desvendar a complexa interação entre o HPV16 e a maquinaria celular, identificando a forma como os oncogenes virais, como o E6 e o E7, contribuem para a transformação celular e a malignidade. Este modelo é também crucial para o rastreio de potenciais agentes farmacológicos e para o desenvolvimento de abordagens de terapia génica destinadas a visar vias específicas alteradas pelo HPV16. Além disso, a linha celular UWO37 constitui uma ferramenta valiosa para estudar a eficácia e a segurança de novas estratégias imunoterapêuticas, que poderão conduzir a um melhor tratamento e prevenção dos cancros relacionados com o HPV.

Tecido
Cavidade oral; amígdala
Doença
Carcinoma de células escamosas da orofaringe
Aplicações
Geração de linhas de células HNSCC HPV-positivas resistentes à cisplatina para estudar a resistência à cisplatina em células HPV-positivas
Sinónimos
  • University of Western Ontario 37

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Identificadores

Referência
UWO37 (número de catálogo Cytion 300257)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Expressão e suscetibilidade

Vírus
Transformante: papilomavírus humano tipo 16 (HPV16); fraca expressão de HPV16 E7

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
64 anos