Siirry sisältöön
UWO37 Solut
Kudos
Suuontelo; nielurisat
Sairaus
Nielun ja suunielun levyepiteelikarsinooma
Synonyymit
University of Western Ontario 37

Asiakirjat

UWO37 Solut

Cell line · Tuotenumero 300257

UWO37 (HPV16) -solulinja on peräisin suun kielen syöpään sairastuneen miespotilaan kasvainsoluista, ja siinä ilmentyy ihmisen papilloomavirusta...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

UWO37 (HPV16) -solulinja on peräisin suulakielisyöpään sairastuneen miespotilaan kasvainsoluista, ja siinä ilmentyy ihmisen papilloomaviruksen tyyppi 16 (HPV16). Tämä solulinja on keskeisessä asemassa tutkittaessa molekyylimekanismeja, joilla HPV16 vaikuttaa pään ja kaulan levyepiteelisolusyövän (HNSCC) patogeneesiin. UWO37 tarjoaa mallijärjestelmän, joka säilyttää alkuperäisen kasvaimen geneettiset ja fenotyyppiset ominaisuudet, ja sen avulla voidaan tutkia yksityiskohtaisesti viruksen aiheuttamaa onkogeneesiä, virusproteiinien ja isäntäsolujen väylien välisiä vuorovaikutuksia sekä HPV16:n integraatioon liittyviä soluvastauksia.

UWO37-solulinjaa hyödyntävässä tutkimuksessa keskitytään HPV16:n ja solukoneiston välisen monimutkaisen vuorovaikutuksen selvittämiseen ja sen tunnistamiseen, miten E6:n ja E7:n kaltaiset viruksen onkogeenit vaikuttavat solumuutokseen ja pahanlaatuisuuteen. Tämä malli on myös ratkaisevan tärkeä mahdollisten farmakologisten aineiden seulonnassa ja sellaisten geeniterapiamallien kehittämisessä, joilla pyritään kohdistamaan HPV16:n muuttamiin tiettyihin reitteihin. Lisäksi UWO37-solulinja on arvokas väline uusien immunoterapeuttisten strategioiden tehokkuuden ja turvallisuuden tutkimiseen, mikä voisi johtaa HPV:hen liittyvien syöpien tehokkaampaan hoitoon ja ehkäisyyn.

Kudos
Suuontelo; nielurisat
Sairaus
Nielun ja suunielun levyepiteelikarsinooma
Sovellukset
Sisplatiiniresistenttien HPV-positiivisten HNSCC-solulinjojen tuottaminen HPV-positiivisten solujen sisplatiiniresistenssin tutkimiseksi
Synonyymit
  • University of Western Ontario 37

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Tunnisteet

Lähdeviite
UWO37 (Cytionin luettelonumero 300257)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_B7MH

04Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Transformantti: ihmisen papilloomavirus tyyppi 16 (HPV16); HPV16 E7:n heikko ilmentyminen

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
64 vuotta