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Cellules Caki-1
Tissu
Rein
Maladie
Carcinome à cellules claires
Synonymes
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Documents

Cellules Caki-1

Cell line · Référence du produit 300149

La lignée cellulaire Caki-1 provient d'un foyer métastatique d'un carcinome rénal à cellules claires humain. Elle a été isolée à partir d'une tumeur située dans la paroi de la veine rénale...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire Caki-1 est dérivée d'un site métastatique d'un carcinome rénal à cellules claires humain. Établies à partir d'une tumeur située dans la paroi de la veine rénale d'un patient de sexe masculin, les cellules Caki-1 sont couramment utilisées dans l'étude de la biologie du cancer du rein, en particulier pour comprendre les mécanismes sous-jacents au carcinome rénal à cellules claires (ccRCC). Cette lignée cellulaire a une morphologie de type épithélial et présente des caractéristiques de croissance in vitro robustes, ce qui la rend appropriée pour une variété de techniques expérimentales, y compris le criblage de médicaments et les études de biologie moléculaire.

Caki-1 est particulièrement remarquable pour son caryotype complexe, caractérisé par un nombre modal de chromosomes de 68, avec des variations allant de 63 à 71. Cette configuration chromosomique aneuploïde met en évidence une gamme triploïde avec certaines anomalies ; notamment, le chromosome Y est absent, ce qui n'est pas inhabituel dans les lignées cellulaires tumorales d'origine masculine. La lignée cellulaire présente plusieurs aberrations chromosomiques, notamment de multiples chromosomes marqueurs et des altérations des chromosomes N5, N9, N10, N16 et N19, ce qui contribue à son utilité dans la recherche sur le cancer.

En termes de tumorigénicité, Caki-1 est capable de former des tumeurs chez la souris nude et il a été rapporté qu'il produisait systématiquement un carcinome à cellules claires, reflétant la pathologie de la tumeur primaire rénale. Cette caractéristique en fait un modèle inestimable pour les études in vivo des métastases du cancer du rein et de la biologie des tumeurs. On a également observé que la lignée cellulaire se métastase à la peau dans des contextes expérimentaux. D'un point de vue biochimique, Caki-1 exprime une variété d'isoenzymes et d'antigènes, y compris le groupe sanguin O, Rh-, et les types HLA A9, B12, Bw35. Le profilage des isoenzymes comprend AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1, et PGM3, qui peuvent être pertinents dans les études du métabolisme cellulaire et de l'expression génétique liés à la progression du cancer et à la réponse aux traitements.

Tissu
Rein
Maladie
Carcinome à cellules claires
Synonymes
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, sur des souris nues

04Identifiants

Référence
Caki-1 (numéro de catalogue Cytion 300149)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
2 x 104 cellules/cm2 est recommandé
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Âge du donneur
49 ans
Origine ethnique
Caucasien