Mine otse sisu juurde
Caki-1 rakud
Kude
Neerud
Haigus
Selverakk-kartsinoom
Sünonüümid
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumendid

Caki-1 rakud

Cell line · Toote number 300149

Caki-1 rakuliin on saadud inimese neeru sel rakk-kartsinoomi metastaasikohast. See on loodud neeru veeni seinas asuvast kasvajast...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Caki-1 rakuliin on saadud inimese neeru selge rakulise kartsinoomi metastaatilisest asukohast. Caki-1 rakke, mis on saadud meessoost patsiendi neeruveeni seinas paiknevast kasvajast, kasutatakse tavaliselt neeruvähi bioloogia uurimisel, eriti selge rakulise neerukartsinoomi (ccRCC) aluseks olevate mehhanismide mõistmiseks. See rakuliin on morfoloogiliselt epiteelilaadne ja sellel on tugevad in vitro kasvuomadused, mistõttu sobib see mitmesuguste katsemeetodite, sealhulgas ravimite skriiningu ja molekulaarbioloogiliste uuringute jaoks.

Caki-1 on eriti tähelepanuväärne oma keerulise karüotüübi poolest, mida iseloomustab 68 kromosoomi modaalne arv, mille varieeruvus ulatub 63-st kuni 71-ni. See aneuploidne kromosoomikonfiguratsioon rõhutab triploidset vahemikku koos teatavate kõrvalekalletega; eelkõige puudub Y-kromosoom, mis ei ole ebatavaline meestelt pärinevate kasvajarakkude liinide puhul. Rakuliinil on mitmeid kromosoomiaberratsioone, sealhulgas mitu markerkromosoomi ja muutused kromosoomides N5, N9, N10, N16 ja N19, mis aitab kaasa selle kasulikkusele vähiuuringutes.

Tumorigeensuse osas on Caki-1 võimeline moodustama alasti hiirtel kasvajaid ja on teatatud, et see tekitab järjekindlalt selgepiirilist kartsinoomi, mis peegeldab neeru primaarse kasvaja patoloogiat. See omadus muudab selle hindamatuks mudeliks neeruvähi metastaaside ja tuumori bioloogia in vivo uuringutes. Katseliselt on täheldatud ka rakuliini metastaseerumist nahale. Biokeemilisest seisukohast ekspresseerib Caki-1 mitmesuguseid isoensüüme ja antigeene, sealhulgas veregruppi O, Rh- ja HLA-tüüpe A9, B12, Bw35. Isoensüümide profiil hõlmab AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3, mis võivad olla olulised vähi progresseerumise ja ravivastusega seotud raku metabolismi ja geneetilise ekspressiooni uuringutes.

Kude
Neerud
Haigus
Selverakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel

04Tunnused

Viide
Caki-1 (Cytioni katalooginumber 300149)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav on 2 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
49 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia