Siirry sisältöön
Caki-1-solut
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Kirkassoluinen karsinooma
Synonyymit
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Asiakirjat

Caki-1-solut

Cell line · Tuotenumero 300149

Caki-1-solulinja on peräisin ihmisen munuaisten kirkassolukarsinooman etäpesäkkeestä. Se on eristetty kasvaimesta, joka sijaitsi munuaislaskimon seinämässä...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Caki-1-solulinja on peräisin ihmisen munuaisten kirkassolusyövän metastaattisesta kohdasta. Caki-1-soluja, jotka on muodostettu miespotilaan munuaislaskimon seinämässä sijaitsevasta kasvaimesta, käytetään yleisesti munuaissyövän biologian tutkimuksessa, erityisesti selväsoluisen munuaissyövän (ccRCC) taustalla olevien mekanismien ymmärtämisessä. Tämä solulinja on morfologialtaan epiteelin kaltainen, ja sillä on vahvat in vitro -kasvuominaisuudet, minkä vuoksi se soveltuu monenlaisiin kokeellisiin tekniikoihin, kuten lääkeseulontaan ja molekyylibiologisiin tutkimuksiin.

Caki-1:n erityispiirteenä on sen monimutkainen karyotyyppi, jolle on ominaista kromosomiluvun 68 modaalinen kromosomiluku, jonka vaihtelut vaihtelevat 63:sta 71:een. Tämä aneuploidinen kromosomikonfiguraatio korostaa triploidista aluetta, jossa on tiettyjä poikkeavuuksia; erityisesti Y-kromosomi puuttuu, mikä ei ole epätavallista miehistä peräisin olevissa kasvainsolulinjoissa. Solulinjassa on useita kromosomipoikkeavuuksia, kuten useita merkkikromosomeja ja muutoksia kromosomeissa N5, N9, N10, N16 ja N19, mikä edistää sen hyödyllisyyttä syöpätutkimuksessa.

Kasvainten muodostumisen osalta Caki-1 kykenee muodostamaan kasvaimia alasti elävissä hiirissä, ja sen on raportoitu tuottavan johdonmukaisesti kirkassoluista karsinoomaa, joka heijastaa munuaisten primaarikasvaimen patologiaa. Tämä ominaisuus tekee siitä korvaamattoman arvokkaan mallin munuaissyövän etäpesäkkeiden ja kasvainten biologian in vivo -tutkimuksiin. Solulinjan on myös havaittu metastasoituvan ihoon kokeellisissa olosuhteissa. Biokemiallisesta näkökulmasta katsottuna Caki-1 ilmentää erilaisia isoentsyymejä ja antigeenejä, mukaan lukien veriryhmä O, Rh- ja HLA-tyypit A9, B12 ja Bw35. Isoentsyymiprofiileihin kuuluvat AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 ja PGM3, joilla voi olla merkitystä syövän etenemiseen ja hoitovasteeseen liittyvän soluaineenvaihdunnan ja geneettisen ilmentymisen tutkimuksissa.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Kirkassoluinen karsinooma
Synonyymit
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä

04Tunnisteet

Lähdeviite
Caki-1 (Cytionin luettelonumero 300149)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositellaan 2 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
49 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen