
- Tissue
- 腎臟
- Disease
- 透明細胞癌
- Synonyms
- CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1
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Caki-1 細胞
Cell line · Product number 300149
The Caki-1 cell line is derived from a metastatic site of a human renal clear cell carcinoma. Established from a tumor located in the wall of the renal ve...
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01General information
- Description
Caki-1 細胞系源自人類腎透明細胞癌的轉移部位。 Caki-1 細胞係源自一名男性患者腎靜脈壁上的腫瘤,常被用於腎癌生物學研究,特別是用於釐清透明細胞腎細胞癌(ccRCC)的發病機制。 該細胞系的形態類似上皮細胞,並展現出強勁的體外生長特性,使其適用於多種實驗技術,包括藥物篩選和分子生物學研究。
Caki-1 因其複雜的核型而特別引人注目,其特徵為模態染色體數為 68,變異範圍介於 63 至 71 之間。 這種非整倍體染色體配置呈現出具有特定異常的三倍體範圍;值得注意的是,該細胞缺乏 Y 染色體,這在源自男性的腫瘤細胞系中並不罕見。 該細胞系呈現多種染色體異常,包括多條標記染色體,以及 N5、N9、N10、N16 和 N19 染色體的變異,這使其在癌症研究中具有實用價值。就致瘤性而言,Caki-1 能夠在裸鼠體內形成腫瘤,且據報導會持續產生透明細胞癌,其病理特徵與原發性腎腫瘤相符。此特性使其成為腎癌轉移與腫瘤生物學體內研究的無價模型。 在實驗環境中,亦觀察到該細胞系會轉移至皮膚。從生化角度來看,Caki-1 表達多種同工酶和抗原,包括 O 型血型、Rh- 以及 HLA A9、B12、Bw35 型。 其同工酶譜包含 AK-1、ES-D、G6PD B、GLO-I、Me-2、PGM1 及 PGM3,這些可能與研究癌症進展及治療反應相關的細胞代謝與基因表達具有關聯性。
- Tissue
- 腎臟
- Disease
- 透明細胞癌
- Synonyms
- CAKI-1
- CaKi-1
- caki-1
- CAKI.1
- CAKI 1
- CAKI1
- Caki1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Tumourigenic
- 是的,在裸鼠身上
04Identifiers
- Citation
- Caki-1(Cytion 型號 300149)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0234
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 建議為 2 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 49年
- Ethnicity
- 高加索人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes