Gå direkt till innehållet
Caki-1-celler
Vävnad
Njurar
Sjukdom
Klarcellig karcinom
Synonymer
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Caki-1-celler

Cell line · Produktnummer 300149

Cellinjen Caki-1 härstammar från en metastaserad del av ett humant klarcelligt njurkarcinom. Den har etablerats från en tumör belägen i väggen av njurvenen...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Caki-1-cellinjen härrör från en metastatisk plats i ett humant renalt klarcelligt karcinom. Caki-1-cellerna har etablerats från en tumör i njurvenen hos en manlig patient och används ofta för att studera njurcancerbiologi, särskilt för att förstå de mekanismer som ligger bakom klarcellig njurcancer (ccRCC). Denna cellinje har en epitelliknande morfologi och uppvisar robusta tillväxtegenskaper in vitro, vilket gör den lämplig för en rad olika experimentella tekniker, inklusive läkemedelsscreening och molekylärbiologiska studier.

Caki-1 är särskilt anmärkningsvärd för sin komplexa karyotyp, som kännetecknas av ett modalt kromosomnummer på 68, med variationer från 63 till 71. Denna aneuploida kromosomkonfiguration belyser ett triploidområde med vissa abnormiteter; i synnerhet saknas Y-kromosomen, vilket inte är ovanligt i tumörcellinjer från män. Cellinjen uppvisar flera kromosomavvikelser, inklusive flera markörkromosomer och förändringar i kromosomerna N5, N9, N10, N16 och N19, vilket bidrar till dess användbarhet inom cancerforskning.

När det gäller tumörframkallande förmåga kan Caki-1 bilda tumörer i nakna möss och har rapporterats konsekvent producera klarcellscarcinom, vilket speglar patologin hos den primära njurtumören. Denna egenskap gör den till en ovärderlig modell för in vivo-studier av metastasering av njurcancer och tumörbiologi. Cellinjen har också observerats metastasera till huden i experimentella miljöer. Ur ett biokemiskt perspektiv uttrycker Caki-1 en mängd olika isoenzymer och antigener, inklusive blodgrupp O, Rh- och HLA-typerna A9, B12 och Bw35. Isoenzymprofileringen omfattar AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 och PGM3, vilka kan vara relevanta i studier av cellulär metabolism och genetiskt uttryck relaterat till cancerutveckling och svar på behandlingar.

Vävnad
Njurar
Sjukdom
Klarcellig karcinom
Synonymer
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Ja, i nakna möss

04Identifierare

Källa
Caki-1 (Cytion katalognummer 300149)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 x 104 celler/cm2 rekommenderas
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
49 år
Etnicitet
Kaukasisk