Přejít na obsah
Buňky Caki-1
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Světlobuněčný karcinom
Synonyma
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenty

Buňky Caki-1

Cell line · Číslo výrobku 300149

Buněčná linie Caki-1 pochází z metastatického ložiska lidského karcinomu ledvin s jasnými buňkami. Byla izolována z nádoru nacházejícího se ve stěně renální žíly...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Caki-1 pochází z metastatického ložiska lidského světlobuněčného karcinomu ledviny. Buňky Caki-1 byly vytvořeny z nádoru umístěného ve stěně ledvinné žíly pacienta mužského pohlaví a jsou běžně používány při studiu biologie renálního karcinomu, zejména při poznávání mechanismů, které jsou základem světlobuněčného renálního karcinomu (ccRCC). Tato buněčná linie má morfologii podobnou epitelu a vykazuje robustní růstové vlastnosti in vitro, takže je vhodná pro různé experimentální techniky, včetně screeningu léčiv a molekulárně biologických studií.

Caki-1 se vyznačuje zejména složitým karyotypem, který je charakterizován modálním počtem chromozomů 68 s odchylkami v rozmezí 63 až 71. Tato aneuploidní konfigurace chromozomů zdůrazňuje triploidní řadu s určitými abnormalitami; zejména chybí chromozom Y, což není u nádorových buněčných linií mužského původu neobvyklé. Buněčná linie vykazuje několik chromozomálních aberací, včetně několika markerových chromozomů a změn chromozomů N5, N9, N10, N16 a N19, což přispívá k její využitelnosti ve výzkumu rakoviny.

Pokud jde o nádorovou aktivitu, linie Caki-1 je schopna vytvářet nádory na nahých myších a byla u ní zaznamenána konzistentní tvorba světlobuněčného karcinomu, který odráží patologii primárního nádoru ledviny. Tato vlastnost z něj činí neocenitelný model pro in vivo studie metastázování karcinomu ledvin a biologie nádorů. U této buněčné linie bylo rovněž pozorováno, že v experimentálních podmínkách metastazuje do kůže. Z biochemického hlediska exprimuje Caki-1 řadu izoenzymů a antigenů, včetně krevní skupiny O, Rh- a typů HLA A9, B12, Bw35. Profilování izoenzymů zahrnuje AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 a PGM3, které mohou být důležité při studiu buněčného metabolismu a genetické exprese související s progresí rakoviny a odpovědí na léčbu.

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Světlobuněčný karcinom
Synonyma
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší

04Identifikátory

Citace
Caki-1 (katalogové číslo Cytion 300149)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Doporučuje se 2 x 104 buněk/cm2.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
49 let
Etnická příslušnost
Kavkazský