الانتقال إلى المحتوى
خلايا كاكي-1
الأنسجة
الكلى
المرض
سرطان الخلايا الصافية
المرادفات
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

المستندات

خلايا كاكي-1

Cell line · رقم المنتج 300149

سلسلة الخلايا Caki-1 مستمدة من موقع منتشر لسرطان الخلايا الصافية الكلوية البشري. وقد تم إنشاؤها من ورم يقع في جدار الوريد الكلوي...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُشتق خط الخلايا Caki-1 من موقع نقيلي لسرطان الخلايا الكلوية الصافية البشري. تم إنشاء خلايا Caki-1 من ورم موجود في جدار الوريد الكلوي لمريض ذكر، وتُستخدم خلايا Caki-1 بشكل شائع في دراسة بيولوجيا سرطان الكلى، وخاصة في فهم الآليات الكامنة وراء سرطان الخلايا الكلوية الصافية (ccRCC). هذا الخط الخلوي شبيه بالخلايا الظهارية في مورفولوجيا الخلايا ويُظهر خصائص نمو قوية في المختبر، مما يجعله مناسباً لمجموعة متنوعة من التقنيات التجريبية، بما في ذلك فحص الأدوية ودراسات البيولوجيا الجزيئية.

يتميز Caki-1 بشكل خاص بنمطه النووي المعقد الذي يتميز برقم كروموسوم نموذجي يبلغ 68، مع وجود اختلافات تتراوح بين 63 و71. يسلط هذا النمط الكروموسوم المختل الصيغة الصبغية الضوء على مجموعة ثلاثية الصبغيات مع بعض التشوهات؛ وعلى وجه الخصوص، لا يوجد كروموسوم Y، وهو أمر غير مألوف في خطوط الخلايا الورمية المشتقة من الذكور. يُظهر هذا الخط الخلوي العديد من الانحرافات الكروموسومية، بما في ذلك كروموسومات علامات متعددة وتغييرات في الكروموسومات N5 و N9 و N10 و N16 و N19، مما يساهم في فائدته في أبحاث السرطان.

من حيث التكاثر الورمي، فإن Caki-1 قادر على تكوين أورام في الفئران العارية وقد تم الإبلاغ عن إنتاج سرطان الخلايا الصافية باستمرار، مما يعكس أمراض الورم الكلوي الأولي. هذه الخاصية تجعله نموذجًا لا يقدر بثمن للدراسات في الجسم الحي حول ورم خبيث سرطان الكلى وبيولوجيا الورم. كما لوحظ أن هذا الخط الخلوي ينتشر إلى الجلد في البيئات التجريبية. من من منظور كيميائي حيوي، يعبر Caki-1 عن مجموعة متنوعة من الإنزيمات المتساوية الأنزيمات والمستضدات، بما في ذلك فصيلة الدم O، وR- وأنواع HLA A9 وB12 وBw35. يشمل التنميط الإيزوإنزيمي AK-1 و ES-D و G6PD B و GLO-I و Me-2 و PGM1 و PGM3، والتي قد تكون ذات صلة بدراسات الأيض الخلوي والتعبير الجيني المرتبط بتطور السرطان والاستجابة للعلاجات.

الأنسجة
الكلى
المرض
سرطان الخلايا الصافية
المرادفات
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية

04المعرّفات

المرجع
كاكي-1 (كتالوج سيتيون رقم 300149)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0234

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
يوصى باستخدام 2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
49 سنة
الأصل العرقي
قوقازي