Preskoči na vsebino
Celice Caki-1
Tkivo
Ledvice
Bolezen
Jasnocelični karcinom
Sinonimi
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenti

Celice Caki-1

Cell line · Številka izdelka 300149

Celična linija Caki-1 izhaja iz metastaznega žarišča človeškega jasnoceličnega karcinoma ledvice. Ustanovljena je bila iz tumorja, ki se je nahajal v steni ledvične vene...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Caki-1 izhaja iz metastatskega mesta človeškega ledvičnega svetloceličnega karcinoma. Celice Caki-1, ki so nastale iz tumorja v steni ledvične vene pri moškem bolniku, se pogosto uporabljajo pri preučevanju biologije ledvičnega raka, zlasti pri razumevanju mehanizmov, na katerih temelji svetlocelični ledvični karcinom (ccRCC). Ta celična linija je po morfologiji podobna epitelijskim celicam in ima močne značilnosti rasti in vitro, zato je primerna za različne eksperimentalne tehnike, vključno s pregledovanjem zdravil in molekularno biološkimi študijami.

Za Caki-1 je še posebej značilen kompleksen kariotip, za katerega je značilno modalno število kromosomov 68 z variacijami od 63 do 71. Ta aneuploidna konfiguracija kromosomov poudarja triploidni obseg z nekaterimi nepravilnostmi; zlasti ni kromosoma Y, kar ni nenavadno pri moških tumorskih celičnih linijah. Celična linija izkazuje več kromosomskih aberacij, vključno s številnimi označevalnimi kromosomi in spremembami kromosomov N5, N9, N10, N16 in N19, kar prispeva k njeni uporabnosti pri raziskavah raka.

Kar zadeva tumorogenost, je Caki-1 sposoben tvoriti tumorje v golih miših in po poročilih dosledno proizvaja svetlocelični karcinom, ki odraža patologijo ledvičnega primarnega tumorja. Zaradi te lastnosti je neprecenljiv model za in vivo študije metastaziranja ledvičnega raka in biologije tumorjev. Pri tej celični liniji so v poskusnih okoljih opazili tudi metastaziranje v kožo. Z biokemičnega vidika Caki-1 izraža različne izoencime in antigene, vključno s krvno skupino O, Rh- in tipi HLA A9, B12, Bw35. Izoencimski profili vključujejo AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 in PGM3, ki so lahko pomembni za študije celičnega metabolizma in genetskega izražanja, povezanega z napredovanjem raka in odzivom na zdravljenje.

Tkivo
Ledvice
Bolezen
Jasnocelični karcinom
Sinonimi
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
Caki-1 (kataloška številka Cytion 300149)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Priporočljivo je 2 x 104 celic/cm2.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
49 let
Etnična pripadnost
Kavkaški