Pāriet uz saturu
Caki-1 šūnas
Audums
Nieres
Slimība
Dzidro šūnu karcinoma
Sinonīmi
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenti

Caki-1 šūnas

Cell line · Preces numurs 300149

Šūnu līnija „Caki-1” ir iegūta no cilvēka nieru gaišo šūnu karcinomas metastāzes vietas. Tā izveidota no audzēja, kas atradās nieru vēnas sienā...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Caki-1 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka nieru gaiššūnu karcinomas metastātiskas vietas. Caki-1 šūnas, kas izveidotas no audzēja, kurš atrodas vīrieša nieru vēnas sieniņā, parasti izmanto nieru vēža bioloģijas pētījumos, jo īpaši, lai izprastu mehānismus, kas ir pamatā gaišūnu nieru šūnu karcinomai (ccRCC). Šai šūnu līnijai ir epitēlijam līdzīga morfoloģija, un tai piemīt stabilas augšanas īpašības in vitro, kas to padara piemērotu dažādām eksperimentālām metodēm, tostarp zāļu skrīningam un molekulārās bioloģijas pētījumiem.

Caki-1 īpaši izceļas ar sarežģītu kariotipu, kam raksturīgs 68 hromosomu skaits ar variācijām no 63 līdz 71 hromosomai. Šī aneuploīdu hromosomu konfigurācija izceļ triploīdu virkni ar noteiktām anomālijām; jo īpaši Y hromosomas nav, kas nav nekas neparasts vīriešu dzimuma audzēju šūnu līnijās. Šai šūnu līnijai ir vairākas hromosomu aberācijas, tostarp vairākas marķieru hromosomas un izmaiņas hromosomās N5, N9, N10, N16 un N19, kas veicina tās lietderību vēža pētījumos.

Attiecībā uz audzēja aktivitāti Caki-1 spēj veidot audzējus nude peļu organismā, un ir ziņots, ka no tās konsekventi veidojas gaiššūnu karcinoma, kas atspoguļo nieru primārā audzēja patoloģiju. Šī īpašība padara to par nenovērtējamu modeli in vivo pētījumiem par nieru vēža metastāzēm un audzēju bioloģiju. Eksperimentālos apstākļos ir novērots, ka šī šūnu līnija metastāzē arī uz ādas. No bioķīmiskā viedokļa raugoties, Caki-1 ekspresē dažādus izoenzīmus un antigēnus, tostarp O, Rh- un HLA A9, B12, Bw35 asinsgrupu. Izoenzīmu profils ietver AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 un PGM3, kas var būt svarīgi pētījumos par šūnu metabolismu un ģenētisko ekspresiju saistībā ar vēža progresēšanu un reakciju uz ārstēšanu.

Audums
Nieres
Slimība
Dzidro šūnu karcinoma
Sinonīmi
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
Caki-1 (Cytion kataloga numurs 300149)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicams 2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
49 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis