Премини към съдържанието
Клетки Caki-1
Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Ясноклетъчен карцином
Синоними
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Документи

Клетки Caki-1

Cell line · Номер на продукта 300149

Клетъчната линия Caki-1 е получена от метастатично огнище на човешки ясноклетъчен карцином на бъбреците. Тя е създадена от тумор, разположен в стената на бъбречната вена...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Caki-1 е получена от метастатичен участък на човешки бъбречен светлоклетъчен карцином. Създадени от тумор, разположен в стената на бъбречната вена на пациент от мъжки пол, клетките Caki-1 се използват често в изследването на биологията на бъбречния рак, особено за разбиране на механизмите, лежащи в основата на светлоклетъчния бъбречноклетъчен карцином (ccRCC). Тази клетъчна линия е с епителиална морфология и има стабилни ин витро характеристики на растеж, което я прави подходяща за различни експериментални техники, включително скрининг на лекарства и молекулярно-биологични изследвания.

Caki-1 се отличава с комплексен кариотип, характеризиращ се с модален брой хромозоми от 68, като вариациите варират от 63 до 71. Тази анеуплоидна хромозомна конфигурация подчертава триплоидния диапазон с някои аномалии; по-специално Y хромозомата отсъства, което не е необичайно за туморните клетъчни линии от мъжки произход. Клетъчната линия демонстрира няколко хромозомни аберации, включително множество маркерни хромозоми и промени в хромозоми N5, N9, N10, N16 и N19, което допринася за нейната полезност в изследванията на рака.

Що се отнася до туморогенността, Caki-1 е способна да образува тумори в голи мишки и е докладвано, че постоянно произвежда светлоклетъчен карцином, който отразява патологията на първичния бъбречен тумор. Тази характеристика го прави безценен модел за in vivo изследвания на метастазите на бъбречния рак и туморната биология. В експериментални условия е наблюдавано, че клетъчната линия метастазира и в кожата. От биохимична гледна точка Caki-1 експресира различни изоензими и антигени, включително кръвна група O, Rh- и HLA типове A9, B12, Bw35. Профилирането на изоензимите включва AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 и PGM3, които могат да бъдат от значение за изследванията на клетъчния метаболизъм и генетичната експресия, свързани с прогресията на рака и отговора на лечението.

Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Ясноклетъчен карцином
Синоними
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки

04Идентификатори

Източник
Caki-1 (каталожен номер на Cytion 300149)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0234

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Препоръчва се 2 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
49 години
Етническа принадлежност
Кавказки