Skip to content
תאי Caki-1
Tissue
כליה
Disease
קרצינומה של תאים שקופים
Synonyms
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Documents

תאי Caki-1

Cell line · Product number 300149

The Caki-1 cell line is derived from a metastatic site of a human renal clear cell carcinoma. Established from a tumor located in the wall of the renal ve...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים Caki-1 נגזר מאתר גרורתי של קרצינומה של תאי כליה ברורים בבני אדם. תאי Caki-1, שהוקמו מתumor הממוקם בדופן וריד הכליה של חולה ממין זכר, משמשים בדרך כלל במחקר הביולוגיה של סרטן הכליה, במיוחד בהבנת המנגנונים העומדים בבסיס קרצינומה של תאי כליה ברורים (ccRCC). קו תאים זה דומה במורפולוגיה שלו לאפיתל ומפגין מאפייני צמיחה חזקים במבחנה, מה שהופך אותו מתאים למגוון טכניקות ניסוייות, כולל סינון תרופות ומחקרים בביולוגיה מולקולרית.

Caki-1 בולט במיוחד בקריוטיפ המורכב שלו, המאופיין במספר כרומוזומים מודאלי של 68, עם וריאציות הנעות בין 63 ל-71. תצורת כרומוזומים אנאופלואידית זו מדגישה טווח טריפלואידי עם חריגות מסוימות; בולטת במיוחד היעדרות כרומוזום Y, דבר שאינו יוצא דופן בקווי תאים ממאירים שמקורם בגברים. קו התאים מציג מספר חריגות כרומוזומליות, כולל כרומוזומים סמנים מרובים ושינויים בכרומוזומים N5, N9, N10, N16 ו-N19, התורמים לשימושיותו במחקר הסרטן.

מבחינת יכולת גידולי, Caki-1 מסוגל ליצור גידולים בעכברים עירומים, ודווח כי הוא מייצר באופן עקבי קרצינומה של תאים ברורים, המשקפת את הפתולוגיה של הגידול הראשוני בכליה. מאפיין זה הופך אותו למודל יקר ערך למחקרים in vivo של גרורות סרטן הכליה וביולוגיה של גידולים. כמו כן, נצפה כי קו התאים גרם לגרורות בעור בתנאים ניסויים. מבחינה ביוכימית, Caki-1 מבטא מגוון של איזואנזימים ואנטיגנים, כולל סוג דם O, Rh- וסוגי HLA A9, B12, Bw35. פרופיל האיזואנזימים כולל AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 ו-PGM3, אשר עשויים להיות רלוונטיים במחקרים על חילוף חומרים תאי וביטוי גנטי הקשורים להתקדמות הסרטן ולהיענות לטיפולים.

Tissue
כליה
Disease
קרצינומה של תאים שקופים
Synonyms
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים

04Identifiers

Citation
Caki-1 (מספר קטלוגי Cytion 300149)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
מומלץ 2 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
49 שנים
Ethnicity
קווקזי