Gå til innholdet
Caki-1-celler
Vev
Nyre
Sykdom
Klarcellet karsinom
Synonymer
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenter

Caki-1-celler

Cell line · Produktnummer 300149

Cellielinjen Caki-1 stammer fra et metastatisk område i et humant klarcellet nyrekarsinom. Den ble etablert fra en svulst som befant seg i veggen av nyrevenen...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Caki-1-cellelinjen er avledet fra et metastatisk område av et humant klarcellet nyrecellekarsinom. Caki-1-cellene ble etablert fra en svulst lokalisert i veggen i en nyrevene hos en mannlig pasient, og de brukes ofte i studier av nyrekreftbiologi, spesielt for å forstå mekanismene som ligger til grunn for klarcellet nyrecellekarsinom (ccRCC). Denne cellelinjen har en epitel-lignende morfologi og robuste in vitro-vekstegenskaper, noe som gjør den egnet for en rekke eksperimentelle teknikker, blant annet screening av legemidler og molekylærbiologiske studier.

Caki-1 er spesielt kjent for sin komplekse karyotype, som kjennetegnes av et modalt kromosomtall på 68, med variasjoner fra 63 til 71. Denne aneuploide kromosomkonfigurasjonen fremhever et triploid område med visse abnormiteter; spesielt er Y-kromosomet fraværende, noe som ikke er uvanlig i svulstcellelinjer avledet fra menn. Cellelinjen viser flere kromosomavvik, inkludert flere markørkromosomer og endringer i kromosomene N5, N9, N10, N16 og N19, noe som bidrar til at den er nyttig i kreftforskning.

Når det gjelder tumorigenisitet, er Caki-1 i stand til å danne svulster i nakne mus, og det er rapportert at den konsekvent produserer klarcellet karsinom, noe som gjenspeiler patologien til den primære nyretumoren. Denne egenskapen gjør den til en uvurderlig modell for in vivo-studier av nyrekreftmetastaser og tumorbiologi. Cellelinjen har også vist seg å metastasere til huden i eksperimentelle forsøk. Fra et biokjemisk perspektiv uttrykker Caki-1 en rekke isoenzymer og antigener, inkludert blodtype O, Rh- og HLA-typene A9, B12 og Bw35. Isoenzymprofilen omfatter AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 og PGM3, som kan være relevante i studier av cellulær metabolisme og genetisk uttrykk i forbindelse med kreftutvikling og respons på behandling.

Vev
Nyre
Sykdom
Klarcellet karsinom
Synonymer
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Caki-1 (Cytion katalognummer 300149)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
49 år
Etnisitet
Kaukasisk