Gå direkte til indholdet
Caki-1-celler
Væv
Nyre
Sygdom
Klarcellet karcinom
Synonymer
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenter

Caki-1-celler

Cell line · Varenummer 300149

Caki-1-cellelinjen stammer fra et metastatisk sted i et humant klarcellet nyrekarcinom. Den er etableret ud fra en tumor, der var placeret i væggen af nyrevenen...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Caki-1-cellelinjen stammer fra et metastatisk sted i et humant renalt klarcellet karcinom. Caki-1-cellerne er etableret fra en tumor i væggen af en nyreven hos en mandlig patient og bruges ofte i studiet af nyrekræftbiologi, især til at forstå de mekanismer, der ligger til grund for klarcellet nyrecellekarcinom (ccRCC). Denne cellelinje har en epitellignende morfologi og udviser robuste in vitro-vækstegenskaber, hvilket gør den velegnet til en række eksperimentelle teknikker, herunder screening af lægemidler og molekylærbiologiske undersøgelser.

Caki-1 er især bemærkelsesværdig for sin komplekse karyotype, der er kendetegnet ved et modalt kromosomtal på 68 med variationer fra 63 til 71. Denne aneuploide kromosomkonfiguration fremhæver en triploid rækkevidde med visse abnormiteter; især er Y-kromosomet fraværende, hvilket ikke er usædvanligt i tumorcellelinjer afledt af mænd. Cellelinjen viser adskillige kromosomafvigelser, herunder flere markørkromosomer og ændringer i kromosomerne N5, N9, N10, N16 og N19, hvilket bidrager til dens anvendelighed i kræftforskning.

Med hensyn til tumorigenicitet er Caki-1 i stand til at danne tumorer i nøgne mus, og det er blevet rapporteret, at den konsekvent producerer klarcellet karcinom, der afspejler patologien i den primære nyretumor. Denne egenskab gør den til en uvurderlig model for in vivo-undersøgelser af nyrekræftmetastaser og tumorbiologi. Man har også set, at cellelinjen metastaserer til huden i eksperimentelle sammenhænge. Fra et biokemisk perspektiv udtrykker Caki-1 en række forskellige isoenzymer og antigener, herunder blodtype O, Rh- og HLA-typerne A9, B12, Bw35. Isoenzymprofilering omfatter AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 og PGM3, som kan være relevante i undersøgelser af cellulær metabolisme og genetisk udtryk i forbindelse med kræftprogression og respons på behandlinger.

Væv
Nyre
Sygdom
Klarcellet karcinom
Synonymer
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Caki-1 (Cytion katalognummer 300149)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2 anbefales
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
49 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk