Przejdź do treści
Komórki Caki-1
Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak jasnokomórkowy
Synonimy
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Dokumenty

Komórki Caki-1

Cell line · Numer produktu 300149

Linia komórkowa Caki-1 pochodzi z ogniska przerzutowego ludzkiego raka nerkowego z jasnymi komórkami. Została wyhodowana z guza zlokalizowanego w ścianie żyły nerkowej...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa Caki-1 pochodzi z przerzutowego miejsca ludzkiego raka jasnokomórkowego nerki. Uzyskane z guza zlokalizowanego w ścianie żyły nerkowej mężczyzny, komórki Caki-1 są powszechnie wykorzystywane w badaniach nad biologią raka nerki, zwłaszcza w zrozumieniu mechanizmów leżących u podstaw raka jasnokomórkowego nerki (ccRCC). Ta linia komórkowa jest morfologicznie podobna do nabłonka i wykazuje silne właściwości wzrostu in vitro, dzięki czemu nadaje się do różnych technik eksperymentalnych, w tym badań przesiewowych leków i badań biologii molekularnej.

Caki-1 jest szczególnie godny uwagi ze względu na złożony kariotyp, charakteryzujący się modalną liczbą chromosomów wynoszącą 68, z wariantami wahającymi się od 63 do 71. Ta aneuploidalna konfiguracja chromosomów podkreśla zakres triploidalny z pewnymi nieprawidłowościami; w szczególności chromosom Y jest nieobecny, co nie jest niczym niezwykłym w liniach komórkowych nowotworów pochodzących od mężczyzn. Linia komórkowa wykazuje kilka aberracji chromosomalnych, w tym wiele chromosomów markerowych i zmiany w chromosomach N5, N9, N10, N16 i N19, co przyczynia się do jej użyteczności w badaniach nad rakiem.

Pod względem nowotworowości, Caki-1 jest zdolny do tworzenia guzów u nagich myszy i konsekwentnie wytwarza raka jasnokomórkowego, odzwierciedlając patologię pierwotnego guza nerki. Ta cecha sprawia, że jest to nieoceniony model do badań in vivo nad przerzutami raka nerki i biologią nowotworów. Zaobserwowano również, że linia komórkowa daje przerzuty do skóry w warunkach eksperymentalnych. Z biochemicznego punktu widzenia, Caki-1 wykazuje ekspresję różnych izoenzymów i antygenów, w tym grupy krwi O, Rh- i HLA typu A9, B12, Bw35. Profilowanie izoenzymów obejmuje AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 i PGM3, które mogą być istotne w badaniach metabolizmu komórkowego i ekspresji genetycznej związanej z progresją raka i odpowiedzią na leczenie.

Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak jasnokomórkowy
Synonimy
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
Caki-1 (numer katalogowy Cytion 300149)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0234

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Zalecane jest 2 x 104 komórek/cm2.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
49 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski