Перейти до вмісту
Клітини Caki-1
Тканина
Нирка
Хвороба
Рідкоклітинна карцинома
Синоніми
CAKI-1, CaKi-1, caki-1, CAKI.1, CAKI 1, CAKI1, Caki1

Документи

Клітини Caki-1

Cell line · Номер товару 300149

Клітинна лінія Caki-1 походить із метастатичного вогнища прозороклітинної карциноми нирки людини. Її було виділено з пухлини, розташованої у стінці ниркової ве...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинну лінію Caki-1 отримано з метастатичного вогнища світлоклітинної карциноми нирки людини. Клітини Caki-1, отримані з пухлини, розташованої в стінці ниркової вени пацієнта-чоловіка, широко використовуються у вивченні біології раку нирки, особливо для розуміння механізмів, що лежать в основі світлоклітинного раку нирки (ccRCC). Ця клітинна лінія має епітеліальну морфологію і демонструє потужний ріст in vitro, що робить її придатною для різних експериментальних методик, включаючи скринінг лікарських препаратів і молекулярно-біологічні дослідження.

Caki-1 особливо вирізняється своїм складним каріотипом, що характеризується модальним числом хромосом 68, з варіаціями від 63 до 71. Ця анеуплоїдна конфігурація хромосом підкреслює триплоїдний діапазон з певними відхиленнями; зокрема, відсутня Y-хромосома, що не є чимось незвичайним для пухлинних клітинних ліній чоловічого походження. Клітинна лінія демонструє кілька хромосомних аберацій, включаючи кілька маркерних хромосом і зміни в хромосомах N5, N9, N10, N16 і N19, що робить її корисною для дослідження раку.

З точки зору туморогенності, Caki-1 здатний утворювати пухлини у голих мишей і, як повідомлялося, постійно призводить до утворення світлоклітинної карциноми, що відображає патологію первинної ниркової пухлини. Ця характеристика робить її безцінною моделлю для вивчення in vivo метастазування раку нирки та біології пухлини. В експериментальних умовах було виявлено, що клітини цієї лінії метастазують у шкіру. З біохімічної точки зору Caki-1 експресує різноманітні ізоферменти та антигени, включаючи групу крові O, Rh- та HLA типів A9, B12, Bw35. Профілювання ізоферментів включає AK-1, ES-D, G6PD B, GLO-I, Me-2, PGM1 і PGM3, які можуть мати значення в дослідженнях клітинного метаболізму і генетичної експресії, пов'язаних з прогресуванням раку і відповіддю на лікування.

Тканина
Нирка
Хвороба
Рідкоклітинна карцинома
Синоніми
  • CAKI-1
  • CaKi-1
  • caki-1
  • CAKI.1
  • CAKI 1
  • CAKI1
  • Caki1

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
Caki-1 (номер за каталогом Cytion 300149)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0234

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Рекомендується 2 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
49 років
Етнічна приналежність
Кавказець