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Tissu
Pancréas
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
Hpac

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HPAC

Cell line · Référence du produit 305309

€430.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire HPAC, dérivée de l'adénocarcinome canalaire pancréatique humain, constitue un modèle essentiel pour l'étude des caractéristiques moléculaires et cellulaires du cancer du pancréas. Connues pour leur utilité dans l'évaluation de l'impact de divers agents chimiothérapeutiques et voies de signalisation, les cellules HPAC présentent des caractéristiques clés typiques du cancer du pancréas, y compris des mécanismes de résistance. Des études récentes impliquant HPAC se sont concentrées sur la compréhension de la résistance aux médicaments, en particulier à l'erlotinib, un inhibiteur de tyrosine kinase qui cible le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR). La recherche a démontré que la résistance à l'erlotinib dans les cellules HPAC est associée à des altérations métaboliques significatives, telles que des changements dans le métabolisme des phospholipides et des acides aminés. Plus précisément, des niveaux accrus d'acylcarnitines à chaîne courte et des changements dans les profils de glycérophospholipides ont été associés à un état métabolique élevé dans les cellules HPAC résistantes à l'erlotinib.

Les cellules HPAC expriment également des métalloprotéinases matricielles (MMP), en particulier la MT1-MMP, qui joue un rôle crucial dans leur comportement invasif. La voie de signalisation Wnt/β-caténine a été impliquée dans la régulation de l'expression des MMP, contribuant ainsi au potentiel de migration et d'invasion des cellules. Il a été démontré que l'application de composés tels que la matrine inhibe la migration des cellules HPAC en régulant à la baisse la MT1-MMP par la suppression de la signalisation Wnt/β-caténine. Ces caractéristiques font de l'HPAC une lignée cellulaire essentielle pour l'exploration des interventions thérapeutiques visant à atténuer la nature agressive et résistante au traitement du cancer du pancréas.

Tissu
Pancréas
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
  • Hpac

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellule canalaire pancréatique
Tumorigène
Oui, chez les souris athymiques

04Identifiants

Référence
HPAC (numéro de catalogue Cytion 305309)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Expression et sensibilité

Expression des protéines

Gènes exprimés : kératine positive, vimentine négative, chromogranine A négative

Facteur de croissance épidermique (EGF), exprimé ; glucocorticoïde, exprimé ; facteur de croissance épidermique (EGF) ; glucocorticoïde

Profil mutationnel
Mutation : CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygote ; Mutation : KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A) ; Mutation : TP53

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L bicarbonate de sodium, 2,5 mM L-glutamine, 15 mM HEPES, 0,5 mM pyruvate de sodium (0,002 mg/ml insuline, 0,005 mg/ml transferrine) ITS+, 40 ng/ml hydrocortisone, 10 ng/ml facteur de croissance épidermique de la souris (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 5% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
64 ans
Origine ethnique
Caucasien