Mine otse sisu juurde
Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
Hpac

Dokumendid

HPAC

Cell line · Toote number 305309

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HPAC rakuliin, mis on saadud inimese kõhunäärme ductuse adenokartsinoomist, on oluline mudel kõhunäärmevähi molekulaarsete ja rakuliste omaduste uurimiseks. HPAC-rakud on tuntud erinevate kemoterapeutiliste ainete ja signaaliradade mõju hindamisel ning neil on kõhunäärmevähile iseloomulikud põhijooned, sealhulgas resistentsusmehhanismid. Hiljutised uuringud, milles on kasutatud HPACi, on keskendunud ravimresistentsuse mõistmisele, eelkõige erlotiniibi, epidermise kasvufaktori retseptorile (EGFR) suunatud türosiinkinaasi inhibiitori suhtes. Uuringud on näidanud, et HPAC-rakkude resistentsus erlotiniibi suhtes on seotud oluliste metaboolsete muutustega, näiteks muutustega fosfolipiidide ja aminohapete ainevahetuses. Konkreetselt on lühikese ahelaga atsüülkarnitiinide suurenenud tase ja muutused glütserofosfolipiidide profiilides seotud erlotiniibiresistentsete HPAC-rakkude kõrgendatud metaboolse seisundiga.

HPAC rakud ekspresseerivad ka maatriksi metalloproteinaase (MMP), eriti MT1-MMP, mis on nende invasiivse käitumise seisukohalt otsustava tähtsusega. Wnt/β-kateniini signaalirada on seotud MMP-de ekspressiooni reguleerimisega, mis aitab kaasa rakkude migratsiooni- ja invasiivsuspotentsiaalile. On näidatud, et selliste ühendite nagu matriini kasutamine pärsib HPAC rakkude migratsiooni, vähendades MT1-MMP-d Wnt/β-kateniini signaaliülekande pärssimise kaudu. Need omadused tõstavad esile HPAC-i kui keskset rakuliini, mille abil uurida terapeutilisi sekkumisi, mille eesmärk on leevendada kõhunäärmevähi agressiivset ja raviresistentset olemust.

Kude
Pankreas
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • Hpac

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Pankrease kaksteistsõrmiksoole rakk
Tuumorigeenne
Jah, atüümsetel hiirtel

04Tunnused

Viide
HPAC (Cytioni katalooginumber 305309)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon

Ekspresseeritud geenid: keratiin positiivne, vimentiin negatiivne, kromograniin A negatiivne

Epidermise kasvufaktor (EGF), ekspresseeritud; glükokortikoid, ekspresseeritud; epidermise kasvufaktor (EGF); glükokortikoid

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homosügootne; Mutatsioon: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homosügootne: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutatsioon: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A): TP53

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM: Ham's F12, 1,2 g/L naatriumvesinikkarbonaat, 2,5 mM L-glutamiin, 15 mM HEPES, 0,5 mM naatriumpüruvaat (0,002 mg/ml insuliini, 0,005 mg/ml transferriini) ITS+, 40 ng/ml hüdrokortisooni, 10 ng/ml hiire epidermise kasvufaktorit (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 5% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
64 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia