Gå direkte til indholdet
Væv
Bugspytkirtel
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
Hpac

Dokumenter

HPAC

Cell line · Varenummer 305309

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HPAC-cellelinjen, der stammer fra humant duktalt adenokarcinom i bugspytkirtlen, fungerer som en vigtig model til undersøgelse af bugspytkirtelcancers molekylære og cellulære egenskaber. HPAC-cellerne er kendt for deres anvendelighed til at evaluere virkningen af forskellige kemoterapeutiske midler og signalveje og udviser vigtige træk, der er typiske for kræft i bugspytkirtlen, herunder resistensmekanismer. Nylige undersøgelser, der involverer HPAC, har fokuseret på at forstå lægemiddelresistens, især over for erlotinib, en tyrosinkinasehæmmer, der er rettet mod den epidermale vækstfaktorreceptor (EGFR). Forskning har vist, at resistens over for erlotinib i HPAC-celler er forbundet med betydelige metaboliske ændringer, f.eks. ændringer i fosfolipid- og aminosyremetabolismen. Specifikt er øgede niveauer af kortkædede acylcarnitiner og ændringer i glycerophospholipidprofiler blevet forbundet med en forhøjet metabolisk tilstand i erlotinib-resistente HPAC-celler.

HPAC-celler udtrykker også matrixmetalloproteinaser (MMP'er), især MT1-MMP, som er afgørende for deres invasive adfærd. Wnt/β-catenin-signalvejen er blevet inddraget i reguleringen af MMP-ekspressionen, hvilket bidrager til cellens migrations- og invasionspotentiale. Anvendelsen af stoffer som matrin har vist sig at hæmme HPAC-cellemigration ved at nedregulere MT1-MMP gennem undertrykkelse af Wnt/β-catenin-signalering. Disse egenskaber fremhæver HPAC som en central cellelinje til udforskning af terapeutiske indgreb, der har til formål at mindske bugspytkirtelkræfts aggressive og behandlingsresistente natur.

Væv
Bugspytkirtel
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • Hpac

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Pancreas duktale celler
Tumorfremkaldende
Yeees, i athymiske mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HPAC (Cytion katalognummer 305309)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression

Gener udtrykt: keratin positiv, vimentin negativ, chromogranin A negativ

Epidermal vækstfaktor (EGF), udtrykt; glukokortikoid, udtrykt; epidermal vækstfaktor (EGF); glukokortikoid

Mutationsprofil
Mutation: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygot; Mutation: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutation: TP53

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L natriumbikarbonat, 2,5 mM L-glutamin, 15 mM HEPES, 0,5 mM natriumpyruvat (0,002 mg/ml insulin, 0,005 mg/ml transferrin) ITS+, 40 ng/ml hydrokortison, 10 ng/ml epidermal vækstfaktor fra mus (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 5% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk