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Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
Hpac

Documenti

HPAC

Cell line · Codice prodotto 305309

€430.00IVA e spese di spedizione escluse
Disponibile
Lotto
Consigliati (partita più recente)
  • CoA
1

01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HPAC, derivata dall'adenocarcinoma duttale del pancreas umano, è un modello essenziale per lo studio delle caratteristiche molecolari e cellulari del cancro del pancreas. Conosciute per la loro utilità nel valutare l'impatto di vari agenti chemioterapici e vie di segnalazione, le cellule HPAC presentano caratteristiche chiave tipiche del cancro del pancreas, compresi i meccanismi di resistenza. Studi recenti che hanno coinvolto HPAC si sono concentrati sulla comprensione della resistenza ai farmaci, in particolare all'erlotinib, un inibitore della tirosin-chinasi che ha come bersaglio il recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR). La ricerca ha dimostrato che la resistenza all'erlotinib nelle cellule HPAC è associata a significative alterazioni metaboliche, come i cambiamenti nel metabolismo dei fosfolipidi e degli aminoacidi. In particolare, l'aumento dei livelli di acilcarnitine a catena corta e i cambiamenti nei profili glicerofosfolipidici sono stati collegati a uno stato metabolico elevato nelle cellule HPAC resistenti a erlotinib.

Le cellule HPAC esprimono anche metalloproteinasi della matrice (MMP), in particolare la MT1-MMP, che è fondamentale per il loro comportamento invasivo. La via di segnalazione Wnt/β-catenina è stata implicata nella regolazione dell'espressione delle MMP, contribuendo al potenziale di migrazione e invasione delle cellule. È stato dimostrato che l'applicazione di composti come la matrina inibisce la migrazione delle cellule di HPAC, downregolando la MT1-MMP attraverso la soppressione del segnale Wnt/β-catenina. Questi attributi evidenziano come l'HPAC sia una linea cellulare fondamentale per l'esplorazione di interventi terapeutici volti a mitigare la natura aggressiva e resistente ai trattamenti del tumore del pancreas.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma
Sinonimi
  • Hpac

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellula duttale pancreatica
Tumorigenico
Sì, in topi atimici

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HPAC (numero di catalogo Cytion 305309)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica

Geni espressi: cheratina positiva, vimentina negativa, cromogranina A negativa

Fattore di crescita epidermico (EGF), espresso; glucocorticoide, espresso; fattore di crescita epidermico (EGF); glucocorticoide

Profilo mutazionale
Mutazione: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), omozigote; Mutazione: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutazione: TP53

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L di bicarbonato di sodio, 2,5 mM di L-glutammina, 15 mM di HEPES, 0,5 mM di piruvato di sodio (0,002 mg/ml di insulina, 0,005 mg/ml di transferrina) ITS+, 40 ng/ml di idrocortisone, 10 ng/ml di fattore di crescita epidermico di topo (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
64 anni
Etnia
Caucasico