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Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
Hpac

Documentos

HPAC

Cell line · Número do produto 305309

€430.00sem impostos nem portes de envio
Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HPAC, derivada do adenocarcinoma ductal pancreático humano, constitui um modelo essencial para o estudo das caraterísticas moleculares e celulares do cancro pancreático. Conhecidas pela sua utilidade na avaliação do impacto de vários agentes quimioterapêuticos e vias de sinalização, as células HPAC apresentam caraterísticas-chave típicas do cancro pancreático, incluindo mecanismos de resistência. Estudos recentes que envolvem HPAC centraram-se na compreensão da resistência aos medicamentos, particularmente ao erlotinib, um inibidor da tirosina quinase que tem como alvo o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). A investigação demonstrou que a resistência ao erlotinib nas células HPAC está associada a alterações metabólicas significativas, tais como alterações no metabolismo dos fosfolípidos e dos aminoácidos. Especificamente, o aumento dos níveis de acilcarnitinas de cadeia curta e as alterações nos perfis de glicerofosfolípidos foram associados a um estado metabólico elevado nas células HPAC resistentes ao erlotinib.

As células HPAC também expressam metaloproteinases de matriz (MMPs), particularmente MT1-MMP, que é crucial para o seu comportamento invasivo. A via de sinalização Wnt/β-catenina tem sido implicada na regulação da expressão de MMPs, contribuindo para o potencial de migração e invasão das células. A aplicação de compostos como a matrina demonstrou inibir a migração das células do HPAC através da regulação negativa da MT1-MMP através da supressão da sinalização Wnt/β-catenina. Estes atributos destacam o HPAC como uma linha celular fundamental para a exploração de intervenções terapêuticas destinadas a atenuar a natureza agressiva e resistente ao tratamento do cancro pancreático.

Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • Hpac

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Célula ductal pancreática
Tumorigénico
Sim, em ratos atímicos

04Identificadores

Referência
HPAC (número de catálogo Cytion 305309)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica

Genes expressos: queratina positiva, vimentina negativa, cromogranina A negativa

Fator de crescimento epidérmico (EGF), expresso; glucocorticoide, expresso; fator de crescimento epidérmico (EGF); glucocorticoide

Perfil mutacional
Mutação: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozigótica; Mutação: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutação: TP53

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L de bicarbonato de sódio, 2,5 mM de L-glutamina, 15 mM de HEPES, 0,5 mM de piruvato de sódio (0,002 mg/ml de insulina, 0,005 mg/ml de transferrina) ITS+, 40 ng/ml de hidrocortisona, 10 ng/ml de fator de crescimento epidérmico de ratinho (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 5% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
64 anos
Etnia
Caucasiano