- Tecido
- Pâncreas
- Doença
- Adenocarcinoma
- Sinónimos
- Hpac
Documentos
HPAC
Cell line · Número do produto 305309
Personalização / Recomendações
- HPACCell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular HPAC, derivada do adenocarcinoma ductal pancreático humano, constitui um modelo essencial para o estudo das caraterísticas moleculares e celulares do cancro pancreático. Conhecidas pela sua utilidade na avaliação do impacto de vários agentes quimioterapêuticos e vias de sinalização, as células HPAC apresentam caraterísticas-chave típicas do cancro pancreático, incluindo mecanismos de resistência. Estudos recentes que envolvem HPAC centraram-se na compreensão da resistência aos medicamentos, particularmente ao erlotinib, um inibidor da tirosina quinase que tem como alvo o recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). A investigação demonstrou que a resistência ao erlotinib nas células HPAC está associada a alterações metabólicas significativas, tais como alterações no metabolismo dos fosfolípidos e dos aminoácidos. Especificamente, o aumento dos níveis de acilcarnitinas de cadeia curta e as alterações nos perfis de glicerofosfolípidos foram associados a um estado metabólico elevado nas células HPAC resistentes ao erlotinib.
As células HPAC também expressam metaloproteinases de matriz (MMPs), particularmente MT1-MMP, que é crucial para o seu comportamento invasivo. A via de sinalização Wnt/β-catenina tem sido implicada na regulação da expressão de MMPs, contribuindo para o potencial de migração e invasão das células. A aplicação de compostos como a matrina demonstrou inibir a migração das células do HPAC através da regulação negativa da MT1-MMP através da supressão da sinalização Wnt/β-catenina. Estes atributos destacam o HPAC como uma linha celular fundamental para a exploração de intervenções terapêuticas destinadas a atenuar a natureza agressiva e resistente ao tratamento do cancro pancreático.
- Tecido
- Pâncreas
- Doença
- Adenocarcinoma
- Sinónimos
- Hpac
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Célula ductal pancreática
- Tumorigénico
- Sim, em ratos atímicos
04Identificadores
- Referência
- HPAC (número de catálogo Cytion 305309)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3517
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
Genes expressos: queratina positiva, vimentina negativa, cromogranina A negativa
Fator de crescimento epidérmico (EGF), expresso; glucocorticoide, expresso; fator de crescimento epidérmico (EGF); glucocorticoide
- Perfil mutacional
- Mutação: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozigótica; Mutação: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutação: TP53
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L de bicarbonato de sódio, 2,5 mM de L-glutamina, 15 mM de HEPES, 0,5 mM de piruvato de sódio (0,002 mg/ml de insulina, 0,005 mg/ml de transferrina) ITS+, 40 ng/ml de hidrocortisona, 10 ng/ml de fator de crescimento epidérmico de ratinho (Fisher Scientific cat# CB-40010)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 5% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 64 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim