- Kudos
- Haima
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- Hpac
Asiakirjat
HPAC
Cell line · Tuotenumero 305309
Räätälöinti / Suositukset
- HPACCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HPAC-solulinja, joka on peräisin ihmisen haiman duktaalisesta adenokarsinoomasta, on tärkeä malli haimasyövän molekyyli- ja soluominaisuuksien tutkimiseen. HPAC-soluilla on haimasyövälle tyypillisiä keskeisiä piirteitä, kuten resistenssimekanismeja, ja ne ovat tunnettuja siitä, että ne ovat käyttökelpoisia erilaisten kemoterapeuttisten aineiden ja signaalireittien vaikutusten arvioinnissa. Viimeaikaisissa HPAC-soluja koskevissa tutkimuksissa on keskitytty ymmärtämään lääkeresistenssiä, erityisesti erlotinibille, joka on epidermisen kasvutekijän reseptoriin (EGFR) kohdistuva tyrosiinikinaasin estäjä. Tutkimukset ovat osoittaneet, että HPAC-solujen erlotinibiresistenssiin liittyy merkittäviä metabolisia muutoksia, kuten muutoksia fosfolipidien ja aminohappojen aineenvaihdunnassa. Erityisesti lyhytketjuisten asyylikarnitiinien lisääntyneet pitoisuudet ja muutokset glyserofosfolipidiprofiileissa on yhdistetty kohonneeseen metaboliseen tilaan erlotinibille resistenteissä HPAC-soluissa.
HPAC-solut ilmentävät myös matriksin metalloproteinaaseja (MMP), erityisesti MT1-MMP:tä, joka on ratkaisevan tärkeää niiden invasiivisen käyttäytymisen kannalta. Wnt/β-kateniini-signalointireitin on todettu osallistuvan MMP:n ilmentymisen säätelyyn, mikä vaikuttaa osaltaan solujen migraatio- ja invasiopotentiaaliin. Matriinin kaltaisten yhdisteiden käytön on osoitettu estävän HPAC-solujen migraatiota alentamalla MT1-MMP:n toimintaa Wnt/β-kateniinisignaalin tukahduttamisen kautta. Nämä ominaisuudet korostavat, että HPAC on keskeinen solulinja, jolla voidaan tutkia terapeuttisia toimenpiteitä haimasyövän aggressiivisen ja hoitoresistentin luonteen lieventämiseksi.
- Kudos
- Haima
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- Hpac
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Solutyyppi
- Haiman ductus-solu
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, athymic-hiirissä
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HPAC (Cytionin luettelonumero 305309)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3517
05Ilmentyminen ja alttius
- Proteiinin ilmentyminen
Ilmaistut geenit: keratiini positiivinen, vimentiini negatiivinen, kromograniini A negatiivinen
Epidermaalinen kasvutekijä (EGF), ilmentynyt; glukokortikoidi, ilmentynyt; epidermaalinen kasvutekijä (EGF); glukokortikoidi
- Mutaatioprofiili
- Mutaatio: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homotsygoottinen; Mutaatio: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homotsygoottinen: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutaatio: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A), homosoluinen: TP53
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L natriumbikarbonaattia, 2,5 mM L-glutamiinia, 15 mM HEPES, 0,5 mM natriumpyruvaattia (0,002 mg/ml insuliinia, 0,005 mg/ml transferriiniä) ITS+, 40 ng/ml hydrokortisonia, 10 ng/ml hiiren epidermaalista kasvutekijää (Fisher Scientific cat# CB-40010)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 5 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 64 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä