Gå til innholdet
Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
Hpac

Dokumenter

HPAC

Cell line · Produktnummer 305309

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HPAC-cellelinjen, som stammer fra humant duktalt adenokarsinom i bukspyttkjertelen, er en viktig modell for å studere molekylære og cellulære egenskaper ved bukspyttkjertelkreft. HPAC-celler er kjent for å være velegnet til å evaluere effekten av ulike kjemoterapeutiske midler og signalveier, og de har viktige egenskaper som er typiske for kreft i bukspyttkjertelen, inkludert resistensmekanismer. Nyere studier med HPAC har fokusert på å forstå resistens mot legemidler, særlig mot erlotinib, en tyrosinkinasehemmer som er rettet mot den epidermale vekstfaktorreseptoren (EGFR). Forskning har vist at resistens mot erlotinib i HPAC-celler er forbundet med betydelige metabolske endringer, som for eksempel endringer i fosfolipid- og aminosyremetabolismen. Spesielt har økte nivåer av kortkjedede acylkarnitiner og endringer i glyserofosfolipidprofiler blitt knyttet til en forhøyet metabolsk tilstand i erlotinib-resistente HPAC-celler.

HPAC-celler uttrykker også matriksmetalloproteinaser (MMP-er), særlig MT1-MMP, som er avgjørende for deres invasive atferd. Wnt/β-catenin-signalveien har vist seg å være involvert i reguleringen av MMP-uttrykk, noe som bidrar til cellenes migrasjons- og invasjonspotensial. Bruk av stoffer som matrin har vist seg å hemme HPAC-cellers migrasjon ved å nedregulere MT1-MMP gjennom undertrykkelse av Wnt/β-catenin-signalering. Disse egenskapene gjør HPAC til en viktig cellelinje for utforskning av terapeutiske intervensjoner som kan redusere bukspyttkjertelkrefts aggressive og behandlingsresistente natur.

Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • Hpac

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Pankreatisk duktal celle
Tumorinduserende
Ja, i athymiske mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HPAC (Cytion katalognummer 305309)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon

Gener uttrykt: keratin positiv, vimentin negativ, kromogranin A negativ

Epidermal vekstfaktor (EGF), uttrykt; glukokortikoid, uttrykt; epidermal vekstfaktor (EGF); glukokortikoid

Mutasjonsprofil
Mutasjon: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygot; Mutasjon: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutasjon: TP53

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L natriumbikarbonat, 2,5 mM L-glutamin, 15 mM HEPES, 0,5 mM natriumpyruvat (0,002 mg/ml insulin, 0,005 mg/ml transferrin) ITS+, 40 ng/ml hydrokortison, 10 ng/ml epidermal vekstfaktor for mus (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 5 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisitet
Kaukasisk