Tartalomra ugrás
Szövet
Hasnyálmirigy
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
Hpac

Dokumentumok

HPAC

Cell line · Termékszám 305309

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A humán hasnyálmirigy ductus adenokarcinómából származó HPAC sejtvonal alapvető modellként szolgál a hasnyálmirigyrák molekuláris és sejtes jellemzőinek tanulmányozásához. A különböző kemoterápiás szerek és jelátviteli útvonalak hatásának értékelésében való hasznosságáról ismert HPAC sejtek a hasnyálmirigyrákra jellemző legfontosabb jellemzőket mutatják, beleértve a rezisztencia mechanizmusokat is. A HPAC-t érintő legújabb tanulmányok a gyógyszerrezisztencia megértésére összpontosítottak, különösen az epidermális növekedési faktor receptort (EGFR) célzó tirozin-kináz inhibitorral, az erlotinibbal szemben. A kutatások kimutatták, hogy a HPAC-sejtek erlotinib rezisztenciája jelentős anyagcsere-változásokkal, például a foszfolipid- és aminosav-anyagcserében bekövetkező változásokkal jár. Konkrétan a rövid szénláncú acilkarnitinek megnövekedett szintjét és a glicerin-foszfolipid profilok változásait az erlotinib-rezisztens HPAC-sejtek emelkedett metabolikus állapotához kapcsolták.

A HPAC-sejtek mátrix metalloproteinázokat (MMP-ket) is expresszálnak, különösen az MT1-MMP-t, ami döntő fontosságú az invazív viselkedésükhöz. A Wnt/β-katenin jelátviteli útvonal szerepet játszik az MMP-expresszió szabályozásában, hozzájárulva a sejtek migrációs és inváziós potenciáljához. Az olyan vegyületek, mint a matrin alkalmazása a Wnt/β-katenin jelátvitel elnyomása révén az MT1-MMP downregulálásával gátolja a HPAC sejtek migrációját. Ezek a tulajdonságok kiemelik a HPAC-ot, mint kulcsfontosságú sejtvonalat a hasnyálmirigyrák agresszív és kezelésre rezisztens természetének enyhítését célzó terápiás beavatkozások feltárására.

Szövet
Hasnyálmirigy
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • Hpac

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Hasnyálmirigy ductus sejt
Daganatképző
Igen, athymikus egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
HPAC (Cytion katalógusszám: 305309)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió

Kifejeződő gének: keratin pozitív, vimentin negatív, kromogranin A negatív

Epidermális növekedési faktor (EGF), kifejezett; glükokortikoid, kifejezett; epidermális növekedési faktor (EGF); glükokortikoid

Mutációs profil
Mutáció: Glu120Ter (c.358G>T), homozigóta; Mutáció: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozigóta: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutáció: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutáció: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A), homogén: TP53

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L nátrium-bikarbonát, 2,5 mM L-glutamin, 15 mM HEPES, 0,5 mM nátrium-piruvát (0,002 mg/ml inzulin, 0,005 mg/ml transzferrin) ITS+, 40 ng/ml hidrokortizon, 10 ng/ml egér epidermális növekedési faktor (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 5% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
64 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi