- Gewebe
- Bauchspeicheldrüse
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Synonyme
- Hpac
Dokumente
HPAC
Cell line · Artikelnummer 305309
Anpassung / Empfehlungen
- HPACCell line€430.00
Empfohlen (frischeste Charge)
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Die HPAC-Zelllinie, die vom menschlichen duktalen Adenokarzinom der Bauchspeicheldrüse abstammt, dient als wichtiges Modell für die Untersuchung der molekularen und zellulären Eigenschaften von Bauchspeicheldrüsenkrebs. HPAC-Zellen sind für ihre Nützlichkeit bei der Bewertung der Auswirkungen verschiedener Chemotherapeutika und Signalwege bekannt und weisen wichtige Merkmale auf, die für Bauchspeicheldrüsenkrebs typisch sind, einschließlich Resistenzmechanismen. Jüngste Studien mit HPAC haben sich auf das Verständnis der Medikamentenresistenz konzentriert, insbesondere gegenüber Erlotinib, einem Tyrosinkinaseinhibitor, der auf den epidermalen Wachstumsfaktorrezeptor (EGFR) abzielt. Die Forschung hat gezeigt, dass die Erlotinib-Resistenz bei HPAC-Zellen mit erheblichen Stoffwechselveränderungen einhergeht, wie etwa Veränderungen im Phospholipid- und Aminosäurestoffwechsel. Insbesondere ein erhöhter Gehalt an kurzkettigen Acylcarnitinen und Veränderungen im Glycerophospholipidprofil wurden mit einem erhöhten Stoffwechselzustand in erlotinib-resistenten HPAC-Zellen in Verbindung gebracht.
HPAC-Zellen exprimieren auch Matrix-Metalloproteinasen (MMPs), insbesondere MT1-MMP, was für ihr invasives Verhalten entscheidend ist. Der Wnt/β-Catenin-Signalweg wird mit der Regulierung der MMP-Expression in Verbindung gebracht, was zur Migration und zum Invasionspotenzial der Zellen beiträgt. Es hat sich gezeigt, dass die Anwendung von Verbindungen wie Matrin die Migration von HPAC-Zellen hemmt, indem MT1-MMP durch die Unterdrückung des Wnt/β-Catenin-Signalwegs herunterreguliert wird. Diese Eigenschaften machen HPAC zu einer wichtigen Zelllinie für die Erforschung therapeutischer Maßnahmen, die darauf abzielen, den aggressiven und behandlungsresistenten Charakter von Bauchspeicheldrüsenkrebs zu mildern.
- Gewebe
- Bauchspeicheldrüse
- Krankheit
- Adenokarzinom
- Synonyme
- Hpac
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Zelltyp
- Duktale Zellen der Bauchspeicheldrüse
- Tumorauslösend
- Ja, bei athymischen Mäusen
04Bezeichner
- Quellenangabe
- HPAC (Cytion Katalognummer 305309)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_3517
05Expression und Anfälligkeit
- Proteinexpression
Exprimierte Gene: Keratin positiv, Vimentin negativ, Chromogranin A negativ
Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), exprimiert; Glucocorticoid, exprimiert; Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF); Glucocorticoid
- Mutationsprofil
- Mutation: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygot; Mutation: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutation: TP53
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- DMEM:Ham's F12, 1,2 g/L Natriumbicarbonat, 2,5 mM L-Glutamin, 15 mM HEPES, 0,5 mM Natriumpyruvat (0,002 mg/ml Insulin, 0,005 mg/ml Transferrin) ITS+, 40 ng/ml Hydrocortison, 10 ng/ml Maus-Epidermis-Wachstumsfaktor (Fisher Scientific cat# CB-40010)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 64 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja