Pereiti prie turinio
Audinys
Kasa
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
Hpac

Dokumentai

HPAC

Cell line · Prekės numeris 305309

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HPAC ląstelių linija, gauta iš žmogaus kasos latakų adenokarcinomos, yra labai svarbus modelis kasos vėžio molekulinėms ir ląstelinėms savybėms tirti. HPAC ląstelės, žinomos kaip naudingos vertinant įvairių chemoterapinių preparatų ir signalinių kelių poveikį, pasižymi pagrindinėmis kasos vėžiui būdingomis savybėmis, įskaitant atsparumo mechanizmus. Naujausiuose tyrimuose, kuriuose dalyvavo HPAC, daugiausia dėmesio skirta atsparumui vaistams, ypač erlotinibui - tirozinkinazės inhibitoriui, nukreiptam prieš epidermio augimo faktoriaus receptorių (EGFR), suprasti. Tyrimai parodė, kad atsparumas erlotinibui HPAC ląstelėse yra susijęs su reikšmingais medžiagų apykaitos pokyčiais, pavyzdžiui, fosfolipidų ir aminorūgščių apykaitos pokyčiais. Konkrečiai padidėjęs trumposios grandinės acilkarnitinų kiekis ir glicerofosfolipidų profilio pokyčiai buvo susiję su padidėjusia erlotinibui atsparių HPAC ląstelių medžiagų apykaitos būkle.

HPAC ląstelės taip pat ekspresuoja matrikso metaloproteinazes (MMP), ypač MT1-MMP, kurios yra labai svarbios jų invazinei elgsenai. Wnt/β-katenino signalinis kelias yra susijęs su MMP raiškos reguliavimu, prisidedančiu prie ląstelių migracijos ir invazijos potencialo. Nustatyta, kad tokių junginių kaip matrinas naudojimas slopina HPAC ląstelių migraciją, mažindamas MT1-MMP, slopindamas Wnt/β-katenino signalą. Šios savybės rodo, kad HPAC yra pagrindinė ląstelių linija, kurią galima naudoti tiriant terapines intervencijas, kuriomis siekiama sumažinti agresyvų ir gydymui atsparų kasos vėžį.

Audinys
Kasa
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • Hpac

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Kasos latakų ląstelės
Tumorogeninis
Taip, athiminių pelių

04Identifikatoriai

Nuoroda
HPAC (Cytion katalogo numeris 305309)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija

Išreikšti genai: keratinas teigiamas, vimentinas neigiamas, chromograninas A neigiamas

Epidermio augimo veiksnys (EGF), išreikštas; gliukokortikoidas, išreikštas; epidermio augimo veiksnys (EGF); gliukokortikoidas

Mutacijų profilis
Mutacija: Glu120Ter (c.358G>T), homozigotinė; Mutacija: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T): KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); mutacija: TP53

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM: Ham's F12, 1,2 g/l natrio bikarbonato, 2,5 mM L-glutamino, 15 mM HEPES, 0,5 mM natrio piruvato (0,002 mg/ml insulino, 0,005 mg/ml transferino) ITS+, 40 ng/ml hidrokortizono, 10 ng/ml pelės epidermio augimo faktoriaus (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 5 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
64 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių