Ga naar de inhoud
Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
Hpac

Documenten

HPAC

Cell line · Productnummer 305309

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HPAC-cellijn, afgeleid van humaan pancreas ductaal adenocarcinoom, dient als een essentieel model voor het bestuderen van de moleculaire en cellulaire kenmerken van pancreaskanker. HPAC-cellen staan bekend om hun nut bij het evalueren van de invloed van verschillende chemotherapeutische middelen en signaalwegen, en vertonen belangrijke kenmerken die typisch zijn voor alvleesklierkanker, waaronder resistentiemechanismen. Recente studies met HPAC hebben zich gericht op het begrijpen van geneesmiddelenresistentie, met name tegen erlotinib, een tyrosinekinaseremmer die gericht is tegen de epidermale groeifactorreceptor (EGFR). Onderzoek heeft aangetoond dat resistentie tegen erlotinib in HPAC-cellen gepaard gaat met significante metabolische veranderingen, zoals veranderingen in het metabolisme van fosfolipiden en aminozuren. Meer specifiek zijn verhoogde niveaus van acylcarnitines met een korte keten en veranderingen in glycerofosfolipideprofielen in verband gebracht met een verhoogde metabolische toestand in erlotinib-resistente HPAC-cellen.

HPAC-cellen brengen ook matrixmetalloproteïnases (MMP's) tot expressie, met name MT1-MMP, wat cruciaal is voor hun invasieve gedrag. De Wnt/β-cateninesignaleringsroute is betrokken bij het reguleren van de MMP-expressie, wat bijdraagt aan het migratie- en invasiepotentieel van de cel. Er is aangetoond dat de toepassing van verbindingen zoals matrine de migratie van HPAC-cellen remt door MT1-MMP te downreguleren via de onderdrukking van de Wnt/β-cateninesignalering. Deze eigenschappen maken HPAC tot een cruciale cellijn voor het onderzoeken van therapeutische interventies gericht op het verminderen van de agressieve en behandelingsresistente aard van alvleesklierkanker.

Weefsel
Alvleesklier
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • Hpac

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Pancreas ductale cel
Tumorverwekkend
Ja, in athymische muizen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HPAC (Cytion catalogusnummer 305309)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_3517

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie

Tot expressie komende genen: keratine positief, vimentine negatief, chromogranine A negatief

Epidermale groeifactor (EGF), uitgedrukt; glucocorticoïd, uitgedrukt; epidermale groeifactor (EGF); glucocorticoïd

Mutatieprofiel
Mutatie: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygoot; Mutatie: KRAS, p.Gly12Asp (c.35G>A); Mutatie: TP53

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM: Ham's F12, 1,2 g/L natriumbicarbonaat, 2,5 mM L-glutamine, 15 mM HEPES, 0,5 mM natriumpyruvaat (0,002 mg/ml insuline, 0,005 mg/ml transferrine) ITS+, 40 ng/ml hydrocortison, 10 ng/ml epidermale groeifactor van de muis (Fisher Scientific cat# CB-40010)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 5% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
64 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch