LN-18

LN-18 est une lignée cellulaire humaine de gliome malin dérivée à l'origine d'une tumeur du lobe temporal d'un patient adulte de sexe masculin atteint d'un glioblastome multiforme (grade IV de Kernohan). La lignée a été établie in vitro et a été maintenue pendant plus de 115 passages en culture monocouche. LN-18 cells exhibit bipolar or stellate morphologies with pleomorphic nuclei and have a doubling time of approximately 72 hours. Bien que les premières cultures et le matériel de biopsie aient exprimé la protéine acide fibrillaire gliale (GFAP), la synthèse de la GFAP n'a pas été observée dans les passages ultérieurs. Cependant, l'origine gliale des cellules a été confirmée par l'analyse ultrastructurale. Les cellules LN-18 ont également montré la présence d'antigènes Ia-like à leur surface et étaient capables de synthétiser des niveaux élevés de fibronectine, deux caractéristiques pertinentes pour la pathologie du gliome et les interactions entre la tumeur et l'hôte.

En termes de tumorigénicité, les cellules LN-18 sont capables de former des tumeurs solides lorsqu'elles sont injectées dans des souris nude, les tumeurs résultantes étant transplantables et histologiquement similaires au glioblastome original. L'analyse caryotypique a révélé la présence de trois chromosomes marqueurs cohérents, fournissant une empreinte cytogénétique pour la lignée cellulaire. Malgré l'absence de GFAP ou de protéine S-100 détectable dans les passages ultérieurs, la lignée LN-18 reste un modèle précieux pour l'étude de la biologie des gliomes humains, notamment en ce qui concerne l'expression des antigènes de surface des cellules, la tumorigénicité et les interactions avec la matrice extracellulaire par le biais de la production de fibronectine. La lignée cellulaire possède également des caractéristiques de croissance stables et se prête à la cryoconservation, ce qui la rend appropriée pour une utilisation expérimentale à long terme.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie