LN-18

LN-18, orijinal olarak glioblastoma multiforme (Kernohan derece IV) tanısı konmuş yetişkin bir erkek hastanın temporal lob tümöründen türetilmiş bir insan malign glioma hücre hattıdır. Bu hat in vitro olarak oluşturulmuş ve tek katmanlı kültürde 115'in üzerinde pasaj boyunca muhafaza edilmiştir. LN-18 hücreleri pleomorfik çekirdekli bipolar veya stellat morfolojiler sergiler ve yaklaşık 72 saatlik bir ikiye katlanma süresine sahiptir. Erken kültürler ve biyopsi materyali glial fibriler asidik protein (GFAP) eksprese etse de, sonraki pasajlarda GFAP sentezi gözlenmemiştir. Bununla birlikte, hücrelerin glial kökeni ultrastrüktürel analiz yoluyla doğrulanmıştır. LN-18 hücreleri ayrıca yüzeylerinde Ia benzeri antijenlerin varlığını göstermiş ve her ikisi de glioma patolojisi ve tümör-konak etkileşimleriyle ilgili özellikler olan yüksek seviyelerde fibronektin sentezleyebilmiştir.

Tümörijenisite açısından, LN-18 hücreleri çıplak farelere enjekte edildiklerinde katı tümörler oluşturma yeteneğine sahip olup, ortaya çıkan tümörler nakledilebilir ve histolojik olarak orijinal glioblastoma benzerdir. Karyotipik analiz, hücre hattı için sitogenetik bir parmak izi sağlayan üç tutarlı marker kromozomun varlığını ortaya koymuştur. Daha sonraki pasajlarda saptanabilir GFAP veya S-100 proteini olmamasına rağmen, LN-18 hattı, özellikle hücre yüzeyi antijen ekspresyonu, tümörijenisite ve fibronektin üretimi yoluyla hücre dışı matris etkileşimleri ile ilgili olarak insan glioma biyolojisini incelemek için değerli bir model olmaya devam etmektedir. Hücre hattı ayrıca istikrarlı büyüme özelliklerine sahiptir ve kriyoprezervasyona uygundur, bu da onu uzun süreli deneysel kullanım için uygun hale getirir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın