LN-18

LN-18 je ľudská bunková línia malígneho gliómu, ktorá bola pôvodne odvodená z nádoru temporálneho laloku dospelého muža s diagnózou multiformného glioblastómu (stupeň IV podľa Kernohana). Táto línia bola vytvorená in vitro a bola udržiavaná viac ako 115 pasáží v monovrstvovej kultúre. Bunky LN-18 majú bipolárnu alebo hviezdicovú morfológiu s pleomorfnými jadrami a zdvojnásobujú sa približne 72 hodín. Hoci skoré kultúry a bioptický materiál exprimovali gliový fibrilárny kyslý proteín (GFAP), v neskorších pasážach sa syntéza GFAP nepozorovala. Gliový pôvod buniek sa však potvrdil prostredníctvom ultraštrukturálnej analýzy. Bunky LN-18 tiež vykazovali prítomnosť antigénov podobných Ia na svojom povrchu a boli schopné syntetizovať vysoké hladiny fibronektínu, čo sú vlastnosti dôležité pre patológiu gliómov a interakcie medzi nádorom a hostiteľom.

Pokiaľ ide o nádorovú aktivitu, bunky LN-18 sú schopné vytvárať solídne nádory po injekčnom podaní nahým myšiam, pričom vzniknuté nádory sú transplantovateľné a histologicky podobné pôvodnému glioblastómu. Karyotypová analýza odhalila prítomnosť troch konzistentných markerových chromozómov, ktoré poskytujú cytogenetický odtlačok bunkovej línie. Napriek absencii detekovateľného proteínu GFAP alebo S-100 v neskorších pasážach zostáva línia LN-18 cenným modelom na štúdium biológie ľudského gliómu, najmä v súvislosti s expresiou povrchových antigénov buniek, nádorovou aktivitou a interakciami extracelulárnej matrix prostredníctvom produkcie fibronektínu. Bunková línia má tiež stabilné rastové vlastnosti a je vhodná na kryokonzerváciu, vďaka čomu je vhodná na dlhodobé experimentálne použitie.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke