Skip to content
LN-18
Tissue
สมอง, กลีบขมับขวา
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
LN 18, LN18, LN018

Documents

LN-18

Cell line · Product number 305822

LN-18 is a human malignant glioma cell line originally derived from a temporal lobe tumor of an adult male patient diagnosed with glioblastoma multiforme ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

LN-18 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งกลีโอมาชนิดร้ายในมนุษย์ ซึ่งได้มาจากเนื้องอกบริเวณกลีบขมับของผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งกลีโอบลาสโตมาหลายรูปแบบ (เกรด IV ตามเกณฑ์ของเคอร์โนฮาน) สายพันธุ์นี้ถูกสร้างขึ้นในหลอดทดลองและได้รับการเลี้ยงดูต่อเนื่องมากกว่า 115 ครั้งในวัฒนธรรมแบบชั้นเดียว เซลล์ LN-18 มีลักษณะเป็นรูปสองขั้วหรือรูปดาวพร้อมนิวเคลียสหลายรูปแบบ และมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 72 ชั่วโมงแม้ว่าวัฒนธรรมยุคแรกและวัสดุชิ้นเนื้อที่ได้จากการตรวจชิ้นเนื้อจะแสดงโปรตีนกรดไฟบริลลารีเกลียล (GFAP) แต่การสังเคราะห์ GFAP ไม่พบในรุ่นหลัง อย่างไรก็ตาม ต้นกำเนิดของเซลล์จากเซลล์เกลียได้รับการยืนยันผ่านการวิเคราะห์โครงสร้างระดับจุลภาค เซลล์ LN-18 ยังแสดงการมีแอนติเจนคล้าย Ia บนพื้นผิวและสามารถสังเคราะห์ไฟโบรเนกตินในระดับสูงได้ ทั้งสองลักษณะนี้มีความเกี่ยวข้องกับพยาธิสภาพของเนื้องอกในสมองชนิดกลีโอมาและการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเนื้องอกกับโฮสต์

ในแง่ของความสามารถในการก่อเนื้องอก เซลล์ LN-18 สามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกแข็งเมื่อฉีดเข้าสู่หนูเมาส์ที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน โดยเนื้องอกที่เกิดขึ้นสามารถปลูกถ่ายได้และมีลักษณะทางเนื้อเยื่อคล้ายกับเนื้องอกกลิโอบลาสโตมาต้นกำเนิด การวิเคราะห์โครโมโซมแบบ karyotype พบว่ามีโครโมโซมเครื่องหมายที่สอดคล้องกันสามตัว ซึ่งให้ลายนิ้วมือทางเซลล์พันธุกรรมสำหรับสายเซลล์นี้แม้ว่าจะไม่พบโปรตีน GFAP หรือ S-100 ที่สามารถตรวจพบได้ในระยะหลัง ๆ แต่สายเซลล์ LN-18 ยังคงเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกในสมองของมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในแง่ของการแสดงออกของแอนติเจนบนผิวเซลล์ ความสามารถในการก่อเนื้องอก และการมีปฏิสัมพันธ์กับเมทริกซ์นอกเซลล์ผ่านการผลิตไฟโบรเนกติน สายเซลล์นี้ยังมีลักษณะการเจริญเติบโตที่เสถียรและสามารถเก็บรักษาในสภาวะเยือกแข็งได้ ทำให้เหมาะสมสำหรับการใช้งานทดลองในระยะยาว

Tissue
สมอง, กลีบขมับขวา
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
  • LN 18
  • LN18
  • LN018

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
ใช่; ใช่, ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ไม่มีขน
Doubling time
72 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
LN-18 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305822)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0392

05Expression and susceptibility

Antigen expression
HLA A2, A9, B5, BW35, DRW3
Oncogenes
P53+ (กลายพันธุ์, TGT (Cys) --> TCT (Ser) การกลายพันธุ์ที่โคดอน 238); PTEN+ (ชนิดปกติ); p16- (ถูกลบ); p14ARF- (ถูกลบ)
Mutational profile
การกลายพันธุ์: การลบยีน, CDKN2A, ชนิดโฮโมไซโกต การกลายพันธุ์, PIK3CB, แบบธรรมดา, p.Glu1051Lys (c.3151G>A), ชนิดโฮโมไซโกต, TP53, แบบธรรมดา, p.Cys238Ser (c.713G>C), ชนิดโฮโมไซโกต

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 5%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
61 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน