LN-18

LN-18 er en human malign gliomcellelinje, der oprindeligt stammer fra en tumor i tindingelappen hos en voksen mandlig patient med diagnosen glioblastoma multiforme (Kernohan grad IV). Linjen blev etableret in vitro og er blevet vedligeholdt i over 115 passager i monolagskultur. LN-18-celler udviser bipolære eller stellate morfologier med pleomorfe kerner og har en fordoblingstid på ca. 72 timer. Selvom tidlige kulturer og biopsimateriale udtrykte glial fibrillary acidic protein (GFAP), blev der ikke observeret GFAP-syntese i senere passager. Cellernes gliale oprindelse blev dog bekræftet via ultrastrukturel analyse. LN-18-celler viste også tilstedeværelsen af Ia-lignende antigener på deres overflade og var i stand til at syntetisere høje niveauer af fibronectin, begge funktioner, der er relevante for gliompatologi og tumor-værtsinteraktioner.

Med hensyn til tumorigenicitet er LN-18-celler i stand til at danne solide tumorer, når de injiceres i nøgne mus, hvor de resulterende tumorer kan transplanteres og histologisk ligner det oprindelige glioblastom. Karyotypisk analyse afslørede tilstedeværelsen af tre konsistente markørkromosomer, hvilket giver et cytogenetisk fingeraftryk for cellelinjen. På trods af manglen på påviseligt GFAP- eller S-100-protein i senere passager er LN-18-linjen fortsat en værdifuld model til undersøgelse af human gliombiologi, især i forhold til celleoverfladeantigenekspression, tumorigenicitet og ekstracellulære matrixinteraktioner gennem fibronectinproduktion. Cellelinjen har også stabile vækstegenskaber og er egnet til kryopræservering, hvilket gør den velegnet til langvarig eksperimentel brug.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring