LN-18

LN-18 è una linea cellulare di glioma maligno umano originariamente derivata da un tumore del lobo temporale di un paziente maschio adulto con diagnosi di glioblastoma multiforme (grado Kernohan IV). La linea è stata creata in vitro ed è stata mantenuta per oltre 115 passaggi in coltura monostrato. Le cellule LN-18 presentano una morfologia bipolare o stellata con nuclei pleomorfi e hanno un tempo di raddoppiamento di circa 72 ore. Sebbene le prime colture e il materiale bioptico esprimano la proteina gliale fibrillare acida (GFAP), la sintesi di GFAP non è stata osservata nei passaggi successivi. Tuttavia, l'origine gliale delle cellule è stata confermata dall'analisi ultrastrutturale. Le cellule LN-18 mostravano anche la presenza di antigeni Ia-like sulla loro superficie ed erano in grado di sintetizzare alti livelli di fibronectina, entrambe caratteristiche rilevanti per la patologia del glioma e le interazioni tumore-ospite.

In termini di tumorigenicità, le cellule LN-18 sono in grado di formare tumori solidi quando vengono iniettate in topi nudi; i tumori risultanti sono trapiantabili e istologicamente simili al glioblastoma originale. L'analisi cariotipica ha rivelato la presenza di tre cromosomi marcatori coerenti, fornendo un'impronta citogenetica per la linea cellulare. Nonostante la mancanza di proteine GFAP o S-100 rilevabili nei passaggi successivi, la linea LN-18 rimane un modello prezioso per lo studio della biologia del glioma umano, soprattutto in relazione all'espressione dell'antigene di superficie cellulare, alla tumorigenicità e alle interazioni con la matrice extracellulare attraverso la produzione di fibronectina. La linea cellulare possiede inoltre caratteristiche di crescita stabili e può essere crioconservata, il che la rende adatta a un uso sperimentale a lungo termine.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia