LN-18

Az LN-18 egy humán rosszindulatú glióma sejtvonal, amely eredetileg egy felnőtt férfi beteg halántéklebenyének daganatából származik, akinél glioblastoma multiformét diagnosztizáltak (Kernohan IV. fokozat). A vonalat in vitro hozták létre, és több mint 115 passzázson keresztül tartották fenn monolayer kultúrában. Az LN-18 sejtek bipoláris vagy csillag alakú morfológiát mutatnak pleomorf sejtmaggal és körülbelül 72 órás megduplázódási idővel rendelkeznek. Bár a korai tenyészetek és a biopsziás anyag gliafibrilláris savas fehérjét (GFAP) expresszált, a GFAP szintézisét a későbbi passzázsokban nem figyelték meg. A sejtek gliális eredetét azonban ultrastrukturális elemzéssel megerősítették. Az LN-18 sejtek felszínükön Ia-szerű antigének jelenlétét is kimutatták, és képesek voltak nagy mennyiségű fibronectint szintetizálni, mindkét jellemző fontos a glióma patológiája és a tumor-gazda interakciók szempontjából.

A tumorigenitás szempontjából az LN-18 sejtek képesek szolid tumorok kialakítására, amikor meztelen egerekbe injektálják őket, az így keletkezett tumorok transzplantálhatók és szövettanilag hasonlóak az eredeti glioblasztómához. A kariotípusos elemzés három konzisztens markerkromoszóma jelenlétét mutatta ki, ami a sejtvonal citogenetikai ujjlenyomatát adja. Annak ellenére, hogy a későbbi passzázsokban nem volt kimutatható GFAP vagy S-100 fehérje, az LN-18 vonal továbbra is értékes modell marad a humán glióma biológiájának tanulmányozására, különösen a sejtfelszíni antigének expressziójával, a tumorigenitással és az extracelluláris mátrix interakciókkal kapcsolatban a fibronektin termelésén keresztül. A sejtvonal stabil növekedési jellemzőkkel is rendelkezik, és alkalmas a kriokonzerválásra, így alkalmas hosszú távú kísérleti felhasználásra.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban