Pereiti prie turinio
LN-18
Audinys
Smegenys, dešinioji momeninė skiltis
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
LN 18, LN18, LN018

Dokumentai

LN-18

Cell line · Prekės numeris 305822

LN-18 – tai žmogaus piktybinės gliomos ląstelių linija, iš pradžių gauta iš suaugusio vyro, kuriam buvo diagnozuota daugiaformė glioblastoma, smegenų skruostinio skilvelio naviko...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

LN-18 yra žmogaus piktybinės gliomos ląstelių linija, iš pradžių gauta iš suaugusio vyro, kuriam diagnozuota daugiaformė glioblastoma (IV Kernohano laipsnio), laikinosios skilties naviko. Ši linija buvo sukurta in vitro ir daugiau kaip 115 kartų palaikoma monosluoksninėje kultūroje. LN-18 ląstelės pasižymi bipoline arba žvaigždiška morfologija su pleomorfiškais branduoliais, o jų padvigubėjimo laikas yra maždaug 72 valandos. Nors ankstyvosios kultūros ir biopsinė medžiaga išreiškė glialinį fibrilinį rūgštinį baltymą (GFAP), vėlesniuose etapuose GFAP sintezė nepastebėta. Tačiau glialinė ląstelių kilmė buvo patvirtinta atlikus ultrastruktūrinę analizę. LN-18 ląstelės taip pat pasižymėjo tuo, kad jų paviršiuje yra į Ia panašių antigenų ir jos gali sintetinti didelį kiekį fibronektino - abi šios savybės yra svarbios gliomos patologijai ir naviko bei šeimininko sąveikai.

LN-18 ląstelės, įšvirkštos į nuogas peles, gali suformuoti kietus navikus, o atsiradę navikai gali būti transplantuojami ir histologiškai panašūs į pirminę glioblastomą. Kariotipinė analizė parodė, kad yra trys nuoseklios žyminčios chromosomos, todėl galima nustatyti šios ląstelių linijos citogenetinį pirštų atspaudą. Nepaisant to, kad vėlesnėse stadijose neaptinkama GFAP ar S-100 baltymo, LN-18 linija išlieka vertingu modeliu žmogaus gliomos biologijai tirti, ypač atsižvelgiant į ląstelių paviršiaus antigenų raišką, navikiškumą ir ekstraląstelinio matrikso sąveiką gaminant fibronektiną. Ši ląstelių linija taip pat pasižymi stabiliomis augimo savybėmis ir yra tinkama kriokonservavimui, todėl tinka ilgalaikiam eksperimentiniam naudojimui.

Audinys
Smegenys, dešinioji momeninė skiltis
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
  • LN 18
  • LN18
  • LN018

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Tumorogeninis
Taip; Taip, formuoja navikus nuogoms pelėms
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
72 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
LN-18 (Cytion katalogo numeris 305822)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0392

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
HLA A2, A9, B5, BW35, DRW3
Onkogenai
P53+ (mutavęs, TGT (Cys) -> TCT (Ser) mutacija 238 kodone); PTEN+ (laukinio tipo); p16- (išbrauktas); p14ARF- (išbrauktas)
Mutacijų profilis
Mutacija: CDKN2A, homozigotinė. Mutacija, PIK3CB, paprasta, p.Glu1051Lys (c.3151G>A), homozigotinė, TP53, paprasta, p.Cys238Ser (c.713G>C), homozigotinė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 5 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
61 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių