LN-18

LN-18 adalah garis sel glioma ganas manusia yang berasal dari tumor lobus temporal pasien pria dewasa yang didiagnosis dengan glioblastoma multiforme (Kernohan grade IV). Lini ini dibuat secara in vitro dan telah dipertahankan selama lebih dari 115 bagian dalam kultur monolayer. Sel LN-18 menunjukkan morfologi bipolar atau stellata dengan inti pleomorfik dan memiliki waktu penggandaan sekitar 72 jam. Meskipun kultur awal dan bahan biopsi mengekspresikan protein asam fibrilasi glial (GFAP), sintesis GFAP tidak diamati pada bagian selanjutnya. Namun, asal sel glial dikonfirmasi melalui analisis ultrastruktural. Sel LN-18 juga menunjukkan adanya antigen seperti Ia pada permukaannya dan mampu mensintesis fibronektin tingkat tinggi, kedua fitur yang relevan dengan patologi glioma dan interaksi tumor-inang.

Dalam hal tumorigenitas, sel LN-18 mampu membentuk tumor padat ketika disuntikkan ke tikus telanjang, dengan tumor yang dihasilkan dapat ditransplantasikan dan secara histologis mirip dengan glioblastoma asli. Analisis kariotipe mengungkapkan adanya tiga kromosom penanda yang konsisten, memberikan sidik jari sitogenetik untuk garis sel. Meskipun tidak terdeteksi adanya protein GFAP atau S-100 pada tahap selanjutnya, garis LN-18 tetap menjadi model yang berharga untuk mempelajari biologi glioma manusia, terutama dalam kaitannya dengan ekspresi antigen permukaan sel, tumorigenitas, dan interaksi matriks ekstraseluler melalui produksi fibronektin. Garis sel ini juga memiliki karakteristik pertumbuhan yang stabil dan dapat menerima kriopreservasi, sehingga cocok untuk penggunaan eksperimental jangka panjang.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami